【摘 要】
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第一部分目的 建立肝癌细胞系HepG2的多药耐药细胞系HepG2/ADM,为研究携mdr1反义RNA重组腺病毒动物体内实验创造前提条件。方法 用0.01μg/ml~2μg/ml的阿霉素(ADM)分级诱导Hep
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第一部分目的 建立肝癌细胞系HepG2的多药耐药细胞系HepG2/ADM,为研究携mdr1反义RNA重组腺病毒动物体内实验创造前提条件。方法 用0.01μg/ml~2μg/ml的阿霉素(ADM)分级诱导HepG2细胞的多药耐药性,使其在含高浓度的ADM(2μg/ml)的DMEM培养基中保持90%的存活率,并能正常的传代、冻存和复苏;用MTT法分析ADM、5-FU、MMC和MTX四种药物在其1Cmax、10Cmax 、20Cmax和30Cmax时分别作用HepG2和HepG2/ADM细胞,观察细胞的耐药性;免疫组化观察细胞膜P-gp170的表达;FCM分析细胞膜P-gp170对进入细胞内药物罗丹明-123的泵出效果。结果 HepG2/ADM细胞系表现了较强抗药活性;免疫组化观察到HepG2/ADM细胞膜有较强P-gp170表达;FCM检测到HepG2/ADM细胞能有效泵出罗丹明-123,而HepG2细胞不能有效泵出罗丹明-123。结论 用ADM梯度诱导耐受法,成功诱导出HepG2细胞的多药耐药细胞系HepG2/ADM。
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