紫杉醇是一类被国内外一致认为多种癌症具有显著疗效的抗癌药物。紫杉醇最初是从红豆杉中提取出来的,具有促进微管蛋白聚合,且抑制其解聚,进而抑制细胞的有丝分裂和肿瘤细胞的复制之新颖作用机制。由于红豆杉树皮中提取的紫杉醇远不能满足市场的需求,且红豆杉树属于濒危植物,因此寻找其它方法成为必须,其中利用微生物发酵法生产紫杉醇显示出了良好的应用前景。实践表明,在传统诱变育种方法的基础上,利用现代基因工程技术可以为构建紫杉醇高产菌株成为重要的研究方法。本实验选择产孢早、产孢多,繁殖能力强的新分离野生紫杉醇产生菌HD86-9(Aspergillus niger var. taxi Zhou, Zhao et Ping, var. nov.)为出发菌株,采用紫外线及紫外线和氯化锂的复合诱变方法对其进行诱变,通过改良S-7发酵培养基的发酵培养、薄层层析对产量的定性检测、高效液相色谱对产量的定量测定,从而筛选出紫杉醇高产菌株。研究表明,通过统计致死率和突变率,紫杉醇产生菌HD86-9的紫外线和浓度为0.6%的氯化锂复合诱变最佳照射时间为15W紫外灯、距离30cm,紫外线照射剂量为7.5～8.5min,选出正变株5株,根据筛选出的高产菌株UL-Ⅲ-1的HPLC峰面积值计算结果,紫杉醇产量紫杉醇产量为372.5μg／L,比出发菌株(产量为274.76μg／L)提高35.6%。在对三株高产菌株和一株原始菌株进行总RNA的提取及鉴定的基础上反转录成cDNA,并以4对锚定引物和10对随机引物进行PCR扩增反应,经聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色后收集差异条带,二次扩增后获得3个差异表达的条带,并对差异条带进行测序和分析。以上研究为进一步分离HD86-9生物合成紫杉醇相关基因提供了理论依据,同时为阐明产紫杉醇的代谢途径,构建高产的基因工程菌株奠定了坚实的基础。