论文部分内容阅读
目的：研究不同腹腔内压力升高和不同持续时间对肝功能和肝细胞的影响,为临床研究腹内高压与多器官功能障碍的关系及其治疗提供实验依据。方法：实验用45只雄性SD (Sprague-Dawley)大鼠随机分为三个组：对照组,腹内压力(intra-abdominal pressure, IAP)10mmHg模型组和IAP20mmHg模型组,每个组15只。实验动物模型采用氮气气腹法来制作SD大鼠腹腔高压的模型,对照组除不充入氮气外,其余步骤与模型组一致。每组15只大鼠再随机分为三个组,每个组5只分别在造模成功持续1h,2hs,4hs后处死。达到预定实验时间后,迅速取腹主动脉血标本检测大鼠血中天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)含量；取大鼠左叶肝组织,部分作HE染色切片光镜下观察肝组织病理变化,部分用电镜液固定并在透射电镜下观察肝细胞超微结构；取大鼠右叶肝组织冻存,后制作成组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性以及丙二醛(MDA)的含量。结果：1.成功制作了腹腔高压的SD大鼠模型。2.肝功能结果：IAP10mmHg4hs组血清AST、ALT含量均显著高于IAP10mmHg1h组(p<0.01)和IAP10mmHg2hs组(p<0.05)；而IAP10mmHg2hs组与IAP10mmHg1h组相比无显著差异。IAP20mmHg4hs组血清ALT、AST含量均显著大于IAP20mmHg1h组(p<0.01)和IAP20mmHg2hs组(p<0.05); IAP20mmHg2hs组血清ALT和AST含量与相同IAP1h组相比也有明显差异(均p<0.05)。持续1h的模型组血清ALT和AST含量与对照组1h组比较无显著差异。模型组2hs血清ALT、AST含量：IAP20mmHg2hs组血清ALT、 AST含量均显著高于对照组2hs组(p<0.01)和IAP10mmHg2hs组(p<0.05)。模型组4hs血清ALT、AST含量变化：IAP20mmHg4hs组血清ALT. AST含量与对照组4hs组比较,有显著差异(p<0.01),与IAP10mmHg4hs组血清比较,AST有显著差异(p<0.05),而ALT的差异无统计学意义；IAP10mmHg4hs组ALT和AST含量与持续4hs的对照组比较,有明显差异(p<0.05)。3.肝组织匀浆SOD,MDA,GSH检测结果：当IAP为10mmHg并持续1,2,4hs的SOD活性与正常对照组并持续1,2,4hs的SOD活性差异无显著改变(均p>0.05)；当IAP为20mmHg时,持续1h组的SOD活性与1h正常对照组的活性无显著差异(p>0.05),而持续2hs和4hs组的SOD活性分别与其对照组的活性有显著差异(均p<0.05)。各组之间肝组织匀浆中MDA含量均无显著差异(p>0.05)。与各自相同持续时间的对照组相比,IAP10mmHg2hs组、IAP10mmHg4hs组、IAP20mmHg1h组、IAP20mmHg2hs组以及IAP20mmHg4hs组的GSH活性显著减少,其差异有统计学意义(均p<0.05)。4.肝组织病理形态学结果：IAP10mmHg4hs组,光镜下,少量肝细胞轻度水肿,中央静脉区附近肝窦轻度肿胀,可见核肿胀空泡；电镜下,可见部分肝细胞膜的纤维突起变钝,胞质内线粒体膜基本完好,但线粒体嵴减少。IAP20mmHg1h组光镜下,少量肝细胞轻度水肿,细胞膜边界清晰度欠佳,肝窦轻度充血；电镜下与IAP10mmHg4hs组相似；IAP20mmHg2hs组肝细胞的损伤范围较前更广。IAP20mmHg4hs组光镜下,肝小叶结构不整齐,可见部分细胞点状坏死,并出现少量炎症细胞浸润；电镜下,可见部分肝细胞膜褶皱,纤维突起消失,核膜完整性受损,核碎裂,胞质内线粒体肿胀,膜不清,线粒体嵴溶解。结论：1.成功制作了动物模型,可复制。2.腹腔高压可导致肝功能损伤：相同IAP时,肝功能损害随持续时间增加而加重；相同持续时间时,肝功能损害随IAP升高而加重。3.腹内高压会导致肝细胞的氧化应激损伤作用,特别是当IAP达到20mmHg及以上。4.一定程度的腹腔高压在持续一定时间后会导致肝细胞病理形态学和细胞超微结构的改变。