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目的：筛选出肿瘤相关抗原GCF2高表达的肝癌细胞株,同时,筛选出干扰效率较高的siRNA序列。并且观察GCF2基因干扰后对BEL-7404细胞株凋亡的影响。方法：(1)通过半定量RT-PCR、western blot及免疫细胞化学技术对BEL-7404、HepG2、SMMC-7721、QGY-7703等4种人肝癌细胞株及正常成人肝细胞株HL-7702中GCF2的表达情况进行检测；(2)使用siRNA干扰技术,设计了5对靶向GCF2基因的siRNA片段,并且通过脂质体2000转染入人肝癌细胞BEL-7404中。实验分为GCF2-1组、GCF2-2组、GCF2-664组、GCF2-863组、GCF2-919组、阴性对照组、脂质体组及空白对照组。分别用半定量RT-PCR和western blot法检测干扰前后各组BEL-7404细胞中GCF2的mRNA和蛋白的相对表达量；(3)用Annexin V-EGFP/PI双染法流式细胞仪检测siRNA干扰GCF2表达后人肝癌细胞株BEL-7404细胞凋亡的情况。结果：(1)半定量RT-PCR的结果显示,GCF2基因在BEL-7404中的相对表达量低于其它肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721及QGY-7703,差异有统计学意义(P<0.001)；且GCF2基因在BEL-7404中的相对表达量也低于正常成人肝细胞株HL-7702,差异有统计学意义(P<0.001)。通过western blot检测发现,BEL-7404、HepG2、SMMC-7721、QGY-7703及HL-7702各细胞株中GCF2蛋白含量不同或不全相同(P=0.015),其中以BEL-7404的相对表达量最高。免疫细胞染色结果显示：GCF2在5种细胞中的胞核及胞质中均有表达,GCF2蛋白在肝癌细胞BEL-7404、HepG2、SMMC-7721、QGY-7703的表达要强于正常肝细胞HL-7702,其中以BEL-7404的表达量最高；(2)靶向GCF2的siRNA干扰结果显示：与阴性对照组、脂质体组及空白对照组比较,GCF2-1组、GCF2-664组、GCF2-863组及GCF2-919组BEL-7404细胞中的GCF2在mRNA水平上的相对表达量均有降低(P<0.05), GCF2-2组中GCF2mRNA相对表达量的下降无显著性差异(P>0.05),其中GCF2-1组中GCF2的相对表达量为0.334±0.093；在蛋白水平上,与各对照组比较,GCF2-1组和GCF2-919组BEL-7404细胞中GCF2蛋白的相对表达量有所降低(P<0.05),而GCF2-2组、GCF2-664组及GCF2-863组中GCF2蛋白的相对表达量下降无显著性差异(P>0.05),其中GCF2-1组BEL-7404中GCF2蛋白的相对表达量为0.737±0.140。在mRNA及蛋白水平上siRNA GCF2-1对BEL-7404中GCF2的干扰效率都是最高,可用于后续实验；(3)通过流式细胞仪检测可见：经siRNA GCF2-1干扰GCF2后,BEL-7404细胞的凋亡率为15.633±2.650,明显高于阴性对照组7.767±0.757,说明GCF2可能对BEL-7404细胞株的凋亡有一定的抑制作用。结论：在mRNA水平上,BEL-7404细胞株中的GCF2相对表达量是最低的；在蛋白水平上,BEL-7404细胞株中GCF2的相对表达量是最高的。且通过免疫细胞化学结果发现GCF2在各细胞株中胞质及胞核均有表达。筛选出siRNA GCF2-1的干扰效率达63.3%,并且发现通过靶向GCF2的siRNA GCF2-1干扰后BEL-7404的凋亡率显著上升。推测GCF2对细胞凋亡有一定的抑制作用,为后续的相关研究奠定基础。