【摘 要】
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目的:建立铜离子转运蛋白hCTR1高表达的卵巢癌稳定细胞株,探讨铜离子转运蛋白hCTR1与卵巢癌铂类药物耐药的相关关系。方法:构建重组逆转录病毒载体pBABEpuro-hCTR1转染包装细
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目的:建立铜离子转运蛋白hCTR1高表达的卵巢癌稳定细胞株,探讨铜离子转运蛋白hCTR1与卵巢癌铂类药物耐药的相关关系。方法:构建重组逆转录病毒载体pBABEpuro-hCTR1转染包装细胞,病毒上清感染人卵巢癌细胞系SKOV-3,用嘌呤霉素筛选;Real Time-PCR和Western Blot检测hCTR1mRNA与蛋白表达。MTT比色法检测顺铂（DDP）对pBABEpuro/SKOV-3、pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测DDP对上述细胞周期的影响;电感耦合等离子质谱法（ICP-MS）测定细胞内铂含量。结果:成功构建hCTR1高表达的SKOV-3稳定细胞株,hCTR1/SKOV-3细胞中hCTR1在蛋白水平表达较对照pBABEpuro -hCTR1/SKOV-3高4倍;DDP对pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3的IC50为18.97±1.24umol/ml,对pBABEpuro/SKOV-3的IC50为29.35±2.12umol/ml（P＜0.01）;DDP对pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3的S期阻滞作用大于pBABEpuro/SKOV-3细胞;pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3细胞对DDP的摄入能力大于pBABEpuro/SKOV-3细胞。结论:hCTR1高表达的卵巢癌稳定细胞株pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3对DDP的摄入能力和敏感性增加。
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