九州虫草中主要药用成分的分离和生物学活性研究

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本文首先利用液质联用的方法,通过对色谱条件的优化,实现了对人工栽培九州虫草子实体中核苷类物质精确的定性和定量研究,结果表明,根据此色谱条件,即色谱柱:Hypersil AA-ODS C18柱(200mm×211mm×5μm);检测波长:260nm;流速:1.0ml/min;柱温:30℃;灵敏度:1.0AUFS;进样量:5μl,流动相:99%水+1%乙腈,洗脱5分钟后梯度过渡为96%H2O+4%ACE具有较好的分离效果,同时将九州虫草和冬虫夏草中核苷类物质的种类和含量进行比较,结果表明九州虫草中含有鸟苷,尿苷,腺苷,2’-脱氧腺苷和3’-脱氧腺苷五种核苷类物质,种类多于冬虫夏草;且九州虫草中虫草素(即3’-脱氧腺苷)的含量为4.356mg/g,明显高于冬虫夏草。因此人工栽培九州虫草可作为虫草素的主要天然来源。 在对虫草素(3’-脱氧腺苷)的临床前期研究中发现,人体内的腺苷脱氨酶易使其脱氨基转化为3’-脱氧肌苷,从而失去药效。如何提高虫草素的药效、减少用量、降低成本成为目前虫草素临床应用研究的热点和难点。随着对纳米药物载体技术的广泛研究,科研人员正尝试将此项技术与中药研究相结合。因此本论文将纳米药物载体技术应用于虫草素的研究,本文采用非稳态共沉淀法制备层状双氢氧化合物(LDH),以人工栽培的九州虫草为原料,分离纯化出虫草素样品,并通过毛细管电泳的方法对提取的样品进行精确的定性和定量研究,然后在特定的条件下将二者通过纳米插层技术相互作用,从而制备了虫草素/LDH生物纳米复合物,并通过透射电镜技术、红外光谱分析、X—射线衍射和毛细管电泳技术对所制备的产物进行性能表征,证实了虫草素确实插层成功并且插层后的虫草素分子具备生物完整性,没有发生结构和性质的改变。最后对该生物纳米复合物进行了体外抑瘤活性的初步研究,结果表明它能够很好的抑制肿瘤细胞U937的生长,其抑瘤效果明显高于等量的虫草素样品。 同时本文又利用超临界CO2萃取技术等,通过单因子实验和正交实验相结合的方法对九州虫草中另一重要活性成分黄酮类化合物进行分离纯化,并从黄酮类化合物的得率和种类两个方面与传统提取方法进行比较,探索出了黄酮类化合
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