目的：侵袭和转移是恶性肿瘤的两个重要生物学特性，是一个极其复杂的多因素、多步骤过程。该过程受瘤细胞之间的粘附作用、对周围细胞外基质蛋白的降解能力以及瘤细胞迁移等因素影响。Rac1属于小G蛋白，是细胞信号转导的枢纽环节，被激活后作用于细胞骨架或其靶蛋白，从而在肿瘤细胞的形态与分化、运动与迁移、增殖与凋亡等恶性表型方面发挥生物效应。MMP-2是基质金属蛋白酶家族成员之一，能够降解细胞外基质和基底膜，促进瘤细胞向周围组织扩散，从而对肿瘤的侵袭和转移产生影响。Ki-67是一种较为肯定的细胞增殖核抗原，被认为是能可靠、全面的反应细胞群体增殖活性的客观指标。　　 本研究拟采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法（S-P法）联合检测75例结直肠癌组织中Rac1、MMP-2、Ki-67基因在蛋白水平上的表达情况，分析其表达与结直肠癌生物学行为及临床病理特征（年龄、性别、肿瘤的大小、分化程度、Ducks分期及淋巴结转移）之间的关系，探讨利用Rac1、MMP-2和Ki-67作为分子标记物评估肿瘤侵袭和转移潜能的可能性，为进一步开展结直肠癌的研究和临床治疗提供病理学依据。　　 方法：　　 1.病例　　 选取邢台医学高等专科学校第一附属医院（邢台市第一医院）病理科2006年9月～2008年10月期间手术切除经病理诊断确诊的75例结直肠癌标本的存档蜡块。年龄25-78岁，中位年龄58岁。发生部位：结肠癌29例，直肠癌46例。按照2000年WHO新的结直肠肿瘤组织学分级标准分类：高分化腺癌（Ⅰ级）19例，中分化腺癌（Ⅱ级）31例，低分化腺癌（Ⅲ级）25例。有淋巴结转移组46例，无淋巴结转移组29例。（根据Ducks分期）A期11例，B期13例，C期23例，D期28例。选取经纤维结肠镜及病理检查未发现异常的大肠黏膜标本12例作为对照。所有患者均为散发病例，且为初次手术，术前均未经放射治疗或化疗。　　 2.免疫组化染色及结果判定　　 采用免疫组化S-P法对结直肠癌中的Rac1、MMP-2和Ki-67表达情况进行半定量研究。Rac1表达定位于癌细胞的细胞质和细胞膜，免疫阳性反应物呈黄色、棕黄色或棕褐色颗粒状。MMP-2表达定位于癌细胞及少量间质细胞的细胞质，免疫阳性反应物呈黄色、棕黄色或棕褐色颗粒状。Ki-67阳性反应为细胞核呈棕褐色，颗粒状。每例均随机观察10个高倍视野（×400），根据镜下棕色反应强度及阳性细胞数，用半定量积分法判定结果。　　 3.统计学处理　　 应用 SPSS10.0 for windows统计软件包对实验结果进行x2检验、Spearman等级相关分析进行检验。　　 结果：　　 1.结直肠癌中Rac1表达情况：　　 正常大肠黏膜组织中均未见Rac1蛋白表达，癌组织中Rac1蛋白阳性表达占76％，Rac1蛋白的阳性表达率明显高于正常大肠黏膜（P<0.01）。Rac1蛋白在高、中、低分化结直肠癌中的阳性表达率分别为57.9％（11/19）、74.2％（23/31）、92％（23/25），不同分化程度的结直肠癌组织中Rac1蛋白表达有显著差别，随着分化程度的降低Rac1蛋白表达呈逐步上升趋势（P<0.05）；在Ducks分期A+B组Rac1蛋白阳性表达率为58.3％（14/24），C+D组阳性表达率为84.3％（43/51），随着Ducks分期的增加Rac1蛋白表达呈逐步上升趋势，统计学有显著差别（P<0.05）；伴淋巴结转移的结直肠癌组织中Rac1蛋白阳性表达率为87％（40/46）明显高于无淋巴结转移组58.6％（17/29），差异有统计学意义（P<0.01）。　　 2.结直肠癌中MMP-2表达情况：　　 正常大肠黏膜组织均未见MMP-2蛋白表达。癌组织中MMP-2蛋白阳性表达占77.3％，在癌细胞和间质细胞胞质中均见不同程度的MMP-2阳性表达，但以癌细胞为主。癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率明显高于正常大肠黏膜（P<0.01）。MMP-2蛋白在高、中、低分化结直肠癌中阳性表达分别为52.6％（10/19）、83.9％（26/31）、88％（22/25），不同分化程度的结直肠癌组织中MMP-2蛋白表达有显著差别，随着分化程度的降低MMP-2蛋白表达呈逐步上升趋势（P<0.05）；在Ducks分期A+B组MMP-2蛋白阳性表达率为58.3％（14/24），C+D组阳性表达率为86.3％（44/51），随着Ducks分期的增加MMP-2蛋白表达呈逐步上升趋势，有显著差别（P<0.05）；伴有淋巴结转移的结直肠癌组织中MMP-2蛋白阳性表达为87％（40/46）明显高于无淋巴结转移组62.1％（18/29），差异有统计学意义（P<0.05）。　　 3.结直肠癌中Ki-67表达情况：　　 正常大肠黏膜上皮细胞大部分未见Ki-67蛋白表达，仅1例阳性细胞百分率为8％，呈弱阳性。癌组织中细胞阳性百分率明显升高，占68％（51/75），其阳性表达率明显高于正常大肠黏膜（P<0.01）。Ki-67蛋白在高、中、低分化结直肠癌中的阳性表达率分别为52.6％（10/19）、61.3％（19/31）、88％（22/25），不同分化程度的结直肠癌组织中Ki-67蛋白表达有显著差别，随着分化程度的降低Ki-67蛋白表达呈逐步上升趋势（P<0.05）；在Ducks分期A+B组Ki-67蛋白阳性表达率为54.2％（13/24），C+D组蛋白阳性表达率为74.5％（38/51），不同Ducks分期的结直肠癌组织中 Ki-67蛋白表达有显著差别，随着Ducks分期的增加Ki-67蛋白表达呈逐步上升趋势（P<0.05）；伴淋巴结转移的结直肠癌组织中Ki-67蛋白阳性表达率为87％（40/46）明显高于无淋巴结转移组51.7％（15/29），差异有统计学意义（P<0.05）。　　 4.结直肠癌中Rac1、MMP-2和Ki-67表达的相互关系　　 在75例结直肠癌中，Rac1和MMP-2表达呈正相关（r=0.65，P<0.01），有统计学意义。而Rac1和Ki-67表达无统计学相关性（r=0.8，P>0.05）。　　 结论：　　 1.Rac1、MMP-2与Ki-67在结直肠癌组织中的表达明显高于正常大肠粘膜，提示这三者的增高可能与结直肠癌的发生、发展有一定的联系。　　 2.直肠癌中Rac1、MMP-2和Ki-67蛋白表达与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有显著关系，提示其增高可能促进结直肠癌的侵袭和转移。　　 3结直肠癌中Rac1与MMP-2表达呈正相关，Rac1与Ki-67的表达无相关性。　　 4.应用免疫组化S-P法联合检测Rac1与MMP-2的表达情况可作为标记物评估肿瘤的侵袭和转移潜能，并能为进一步的研究和临床治疗提供病理学依据。