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免疫力低下是现代社会中人们普遍存在的一种亚健康状态,人体在此状态下易受病原菌入侵,使机体受到损害。免疫应答作为重要的人体保护屏障,与人体的健康有着直接的关系,免疫力强弱对于人体健康具有非常重要的意义。通过研究具有免疫调节肽的天然食物,筛选出其中的功能性物质,可制成保健品或营养品来提高人体免疫力。鸡胚蛋作为一种民间药膳补品,因营养丰富,口感滑嫩等优点,有长久的被食用历史。研究报道表明,鸡胚蛋匀浆物、鸡胚蛋水溶物、鸡胚蛋脂溶物,均对调节免疫力起促进作用。本文以鸡胚蛋为原料,通过蛋白质提取、优化水解工艺、鸡胚多肽分离获得不同分子量大小的鸡胚多肽,探究其对于免疫力的增强和调节作用。本文以13日龄的鸡胚蛋为原料,提取蛋白后获得鸡胚粗蛋白,通过单因素和响应面实验探究枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶在内的五种蛋白酶的酶解效果,优化菠萝蛋白酶水解鸡胚的酶解工艺,其中水解度最高的组合为在pH为6、酶与底物比3%、酶解温度45℃的条件下,使用菠萝蛋白酶酶解鸡胚,酶解时间为7 h。在优化鸡胚蛋酶解工艺的基础上,以最优工艺条件酶解鸡胚蛋后获得鸡胚多肽,利用超滤和透析技术,获得分子量为小于1 kDa、1-5 kDa、5-10 kDa、大于10 kDa的四组鸡胚多肽。调节四个组分的浓度,给予小鼠巨噬细胞,空白对照组给予完全培养基,与对照组实验相比,不同浓度的四组鸡胚多肽在细胞增殖和中性红吞噬的实验中,均促进小鼠巨噬细胞增殖并增强巨噬细胞吞噬活性。将小鼠巨噬细胞RAW264.7分为三组,分别给予完全培养基、脂多糖(LPS)、脂多糖和不同浓度鸡胚多肽。LPS可抑制细胞免疫功能,促进巨噬细胞NO的释放,及NF-κB、Toll-like Receptors免疫通路中相关免疫因子(iNOS、IL-6、IL-10、TNF-α、TLR4)的基因表达。给予鸡胚多肽刺激巨噬细胞的实验组与脂多糖刺激的实验组比较,巨噬细胞NO的释放量、iNOS mRNA、IL-6mRNA、IL-10 m RNA、TNF-αm RNA、TLR4 m RNA的基因表达回调,说明鸡胚多肽对于增强免疫力起促进作用。