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目的:探讨低强度脉冲超声(Low-Intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS)对SD大鼠牙囊细胞(rat dental follicle cells,rDFCs)、骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)成骨分化能力的影响。方法:体外分离培养rDFCs、rBMSCs,流式细胞术检测细胞表面标记物表达,茜素红染色、油红染色鉴定细胞多向分化能力;分别于第7d、21d采用定量PCR及茜素红染色检测LIPUS(30m W/cm2,20min/d)对rDFCs、rBMSCs体外成骨分化的影响;然后,将rDFCs、rBMSCs分别接种无机诱导因子复合性组织工程支架材料进行培养,于第3、5、7、9天采用扫描电镜观察细胞生长情况;最后,分别构建rDFCs-支架材料及rBMSCs-支架材料的细胞三维培养复合体,分组进行裸鼠皮下移植:(1)支架材料组(空白对照组);(2)rDFCs+支架材料组;(3)rBMSCs+支架材料组;(4)rDFCs+支架材料组+LIPUS组;(5)rBMSCs+支架材料+LIPUS组;LIPUS组(30m W/cm2,20min/d)对植入部位进行辐照,8周后收集样本,制作组织切片,HE和Masson染色观察组织修复状况。结果:本研究成功分离培养rDFCs、rBMSCs,流式细胞仪检测提示两种细胞均具有间充质干细胞特征,茜素红及油红染色实验提示两种细胞具备多向分化潜能;定量PCR检测发现LIPUS处理组ALP、Runx2、OSX、COL-1相对表达量较空白对照组更高;茜素红染色结果显示LIPUS处理组较对照组染色更明显,钙结节数量更多;扫描电镜观察结果显示rDFCs、rBMSCs可顺利粘附在材料上,随培养时间的增加,支架材料表面及孔隙中可见大量细胞生长,呈梭形,可见细胞分泌细胞外基质;HE染色结果显示空白对照组未见明显细胞及新生组织存在。rDFCs+支架材料组及rBMSCs+支架材料组可见少量细胞及新生类骨组织;rDFCs+支架材料组+LIPUS组及rBMSCs+支架材料+LIPUS组支架材料间可见大量细胞及类骨组织;Masson染色结果显示空白对照组未见明显细胞及新生纤维组织,rDFCs+支架材料组及rBMSCs+支架材料组可见少量细胞、新生纤维组织及血管组织存在;rDFCs+支架材料组+LIPUS组及rBMSCs+支架材料+LIPUS组细胞数量明显增多,可见大量新生纤维组织及血管组织。结论:体外联合LIPUS辐照可在一定程度上增强rDFCs、rBMSCs成骨分化能力;电镜扫描结果证明rDFCs、rBMSCs接种无机诱导因子复合性组织工程支架材料后生长良好;构建rDFCs-支架材料及rBMSCs-支架材料的细胞三维培养复合体并植入裸鼠皮下,LIPUS辐照后能有效提高rDFCs、rBMSCs骨组织再生能力。以上结果初步提示LIPUS可在一定程度上促进rDFCs、rBMSCs成骨分化,为LIPUS物理刺激应用于牙周组织工程提供了一定的参考依据。