BBR治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎及其机制研究

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多发性硬化(MS)是一种慢性中枢神经系统自身免疫性疾病,以分散性的脱髓鞘、轴索损伤和炎性活动为特征。实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是公认的研究人类多发性硬化的理想动物模型,具有与多发性硬化相似的免疫及病理特征。盐酸小檗碱(BBR)是自小檗科黄连属植物黄连的根状茎中提取的主要有效成分,具有抗炎、抗菌及抗肿瘤的特性。 本研究用少突胶质细胞糖蛋白(MOG)免疫小鼠诱导EAE,在EAE发病的起始,治疗组给予药物BBR灌胃治疗,同时对照组给予高压灭菌双蒸水,对两组小鼠进行临床评分和组织病理学检查。研究发现,与对照组相比,治疗组EAE的发病程度明显缓解,病灶部位的炎症性浸润和脱髓鞘程度减轻。ELISA检测细胞因子发现BBR治疗组小鼠促炎症性细胞因子IL-17、IFN-γ和TNF-α分泌下降,Th2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-10分泌增加。3H摄入实验显示体外BBR药物处理的MOG特异性T细胞增殖明显被抑制,抑制程度随着药物浓度的增加而加强。体外进一步采用流式染色分析细胞的凋亡,结果表明,BBR能促进MOG特异性CD4+T细胞的凋亡,并呈剂量依赖性;并且凋亡相关蛋白Fas、FasL和Caspase3的表达也随着BBR浓度的上升而增加。实时定量PCR结果显示药物处理组的抗凋亡基因Bcl-2表达明显下调,G1期细胞周期蛋白cyclinD、CDK4、CDK6基因表达下调,而G1期负调控基因p27表达上调。综上所述,BBR能够抑制MOG特异性T细胞的增殖和诱导CD4+T细胞的凋亡,从而缓解了EAE的发病。机制可能是与下调抗凋亡基因Bcl-2的表达和阻滞细胞周期进程有关。
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