论文部分内容阅读
【研究背景】化学治疗方法作为恶性肿瘤的主要治疗手段之一，但是在临床治疗的实际过程中疗效往往不尽人意，认为其可能与：①肿瘤细胞获得多药耐药性（multidrug resistance，MDR）；②化疗的毒副作用；③肿瘤的异质性（hetorogeneous）等因素有关[13]。目前有研究认为：实体瘤部分细胞缺氧和肿瘤组织的异质性（hetorogeneous）可能是导致肿瘤对放疗和化疗产生耐受的主要原因之一，缺氧可以诱导肿瘤细胞对放疗和化疗的耐受性[4]，实体肿瘤的异质性可使同一瘤组织内具有不同增殖潜能的癌细胞亚群（subpopulation）存在，导致细胞周期特异性化疗药物作用的靶细胞减少。因此，改善肿瘤组织的供氧状况，使乏氧的肿瘤细胞获得充足的氧来增强其对放疗和化疗的敏感性[5]；亦可同步细胞的增殖状况，有效提高化疗药物作用。高压氧(hyperbaric oxygen，HBO)作为一种治疗和辅助治疗手段已广泛应用于临床，但对HBO能否用于肿瘤的治疗或辅助治疗，如何提高化疗药物的敏感性和降低其毒副作用尚有待进一步阐明。【目的】①探讨不同压力HBO暴露后不同时间对结肠癌细胞周期的影响；②探讨HBO联合细胞周期特异性化疗药物（5FU）对结肠癌细胞的杀伤作用；③探讨HBO对结肠癌细胞HIF1α和VEGF mRNA表达的影响。【材料和方法】①人结肠癌细胞株：LoVo、SW480和CaCo2，分别暴露在HBO下，高压氧压力为0.10、0.15、0.20和0.25MPa，氧浓度分别为8.4%(常氧)、95%；②应用流式细胞仪检测HBO暴露对结肠癌细胞周期的影响；③利用MTT法观察HBO联合化疗药物5FU对结肠癌细胞的杀伤作用；④采用RTPCR法检测HBO暴露后结肠癌细胞HIF1α和VEGF mRNA的表达。【结果】㈠流式细胞仪检测结果：①压力在0.20MPa HBO暴露可使LoVo细胞在细胞周期S期积聚，与对照组、0.10、0.15、0.25 MPa组比较有显著性差异（P<0.01）；②0.20MPa HBO暴露后24h S期细胞积聚高于HBO暴露后12h和48h（P<0.01）；③0.20MPa HBO暴露后24hLoVo细胞S期积聚高于SW480和CaCo2细胞（P<0.01）。㈡MTT分析结果显示：①低浓度5FU（≤8μM）作用癌细胞12 h后，HBO+5FU组与5FU组有差异(P <0.05)，药物作用48h后，HBO+5FU组与5FU组比较有显著性差异(P<0.01)；中、高浓度5FU（16、32、64μM）作用癌细胞12h，HBO+5FU组与5FU组无差异(P＞0.05)，药物作用48h后，HBO+5FU组与5FU组比较有差异(P<0.05)，药物作用72h