许多免疫治疗方法已应用于临床抗肿瘤治疗,但治疗效果并不理想。髓系来源抑制细胞（myeloid-drived suppressor cells,MDSCs）就是介导肿瘤免疫逃逸的罪魁祸首之一,该细胞是一个未分化成熟的、异质性的、具有强大免疫抑制功能的髓系细胞群体,在荷瘤宿主的骨髓、脾脏及肿瘤组织内大量聚集,但MDSC迁移和募集到肿瘤组织的机制尚不完全清楚。肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor,TNF-α）是一类重要的促炎细胞因子,在肿瘤微环境中,广泛表达于肿瘤细胞和肿瘤间质细胞。现有文献报道TNF-α可通过诱导CXCR4表达介导间充质干细胞（MSC）迁移至炎症和损伤组织局部,还可通过调控CXCL12/CXCR4促进卵巢上皮癌细胞侵袭和转移,炎症介质PGE2可诱导CXCL12/CXCR4表达而介导MDSC迁移至卵巢癌组织中等等,因此,我们推测TNF-α可能通过调控趋化因子轴CXCL12/CXCR4而促进MDSC的募集与迁移。本研究旨在探讨跨膜型和分泌型TNF-α（tmTNF-α和sTNF-α）对MDSC迁移的影响及其分子机制,为肿瘤治疗提供新的线索。主要结果如下:一、阻断TNFR信号能改善荷瘤小鼠生存状况Tnfr-/-小鼠接种肝癌细胞H22后,前期肿瘤逐渐增大,到12天后达到最大,随后逐渐减小,三周后几乎完全消失,其生存期较野生荷瘤鼠明显延长或几乎不受肿瘤的影响,其脾脏重量明显轻于野生荷瘤鼠的脾脏,与正常小鼠脾脏接近,该结果表明阻断TNFR信号能改善荷瘤小鼠生存状况。二、阻断TNFR信号可降低MDSC的募集取H22细胞皮下接种小鼠18天后,采用流式细胞术检测荷瘤鼠骨髓、外周血、脾脏及肿瘤组织中CDllb+Grl+MDSC百分比,结果显示,与野生荷瘤鼠比较,Tnfr-/-荷瘤小鼠骨髓中MDSC百分比没有显著差异,而外周血、脾脏与肿瘤组织局部MDSC百分比明显降低,免疫组化技术检测结果也表明肿瘤组织中浸润的Grl+细胞数量显著低于野生鼠,而且,趋化实验进一步证实Tnfr-/-荷瘤鼠骨髓中MDSC向肿瘤组织匀浆迁移的趋化指数显著低于野生MDSC,上述结果提示TNFR信号阻断后,荷瘤鼠骨髓里产生的MDSC数量并没有减少,而是减低MDSC向外周免疫器官及肿瘤组织局部募集和迁移。三、阻断TNFR信号可通过下调CXCR4的表达而减低MDSC的募集分离纯化荷瘤鼠骨髓MDSC,首先采用realtime PCR检测与白细胞迁移相关的趋化因子受体的mRNA水平,结果表明Tnfr-/-荷瘤鼠骨髓MDSC表面的CCR2、CXCR4和CXCR2的mRNA表达水平明显低于野生鼠,其中CXCR4水平减低幅度最大,流式细胞术检测结果也证实在Tnfr-/-荷瘤鼠体内,无论骨髓、脾脏还是肿瘤组织中,MDSC的CXCR4蛋白水平均显著低于野生荷瘤鼠;ELISA检测肿瘤组织匀浆中CXCR4配体CXCL12的水平,结果发现Tnfr-/-鼠肿瘤组织中表达的CXCL12并不比野生鼠的低,反而显著增高。进一步用趋化实验证实,如果预先用抗体封闭野生鼠MDSC表面的CXCR4后,其向肿瘤组织匀浆迁移的趋化指数显著降低,所有这些结果提示阻断TNFR信号可能通过下调CXCR4的表达而减低MDSC的募集。四、tmTNF通过TNFR2诱导MDSC表达CXCR4取sTNF-α和tmTNF-α分别刺激野生荷瘤鼠MDSC,然后,用流式细胞术检测MDSC细胞膜上CXCR4的表达,结果发现tmTNF-α而不是sTNF-α能诱导MDSC高表达CXCR4;进一步从Tnfr1-/-荷瘤鼠和Tnfr2-荷瘤鼠分离纯化骨髓MDSC,然后用tmTNF-α刺激,结果显示Tnfr1-/-荷瘤鼠MDSC的CXCR4的表达率（36.9%）与野生荷瘤鼠MDSC比较无明显差异（P＞0.05）,但Tnfr2/-荷瘤鼠MDSC的CXCR4的表达率（4.8%）与野生荷瘤鼠MDSC的比较显著降低（P＜0.01）;如果直接用p38抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC预处理MDSC 40min后再加入tmTNF-α刺激,结果MDSC表达的CXCR4显著降低。上述结果提示:tmTNF-α通过与TNFR2结合,激活NF-κB和P38信号通路,从而诱导MDSC表达CXCR4。总之,tmTNF-α而不是sTNF-α通过与TNFR2结合,激活NF-κB和P38信号通路,诱导MDSC表达CXCR4,继而促进MDSC募集和迁移至肿瘤组织,抑制肿瘤免疫,加速肿瘤的进程。该研究为临床抗肿瘤治疗提供新的线索和新思路。