目的:1、通过动物及细胞实验探讨血府逐瘀汤对缺血心肌的保护作用机制;2、临床观察研究血府逐瘀汤对稳定型心绞痛（气滞血瘀型）的临床疗效,评价其有效性及安全性,并对患者血清中ROS、SOD、MDA含量进行测定;方法:1.实验研究1.1网络药理学:通过TCMSP、TCMID、BATMAN-TCM等数据库对血府逐瘀汤的有效成分进行筛选,与Drug Bank、Gene Card、OMIM、Disgenet等数据库预测的疾病靶点进行匹配,获取关键基因,然后进行GO和KEGG分析预测血府逐瘀汤作用机制。最后运用动物及细胞实验对预测机制进行验证。1.2动物实验:试验采用清洁级雌性C57BL/6小鼠40只,随机分为4组:空白组（Control组）、模型组（ISO组）、模型组+XFZY低剂量组（ISO+XFZY-Low Dose）、模型组+XFZY高剂量组（ISO+XFZY-High Dose）,其中空白组给予生理盐水5mg/kg/d,模型组给予异丙肾上腺素5mg/kg/d,连续应用14天。模型组+XFZY低剂量组（ISO+XFZY-Low Dose）、模型组+XFZY高剂量组（ISO+XFZY-High Dose）在模型组基础上分别给予血府逐瘀汤10g/kg、20g/kg,每日2次灌胃,空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。采用HE染色观察心肌细胞形态;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;ELASA法检测CK、CK-MB、cTnI、LDH、SOD、MDA、cGMP含量;western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3、PKG1蛋白表达;PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3基因表达。1.3含药血清制备:本实验采用5只雌性C57BL/6小鼠,正常喂养3天后给予血府逐瘀汤灌胃10天,小鼠给药剂量参考人/动物体表面积折算等效剂量比率表,小鼠药物等效剂量相当于人的0.0025倍,每只动物每千克体质量给药量按临床人（70 kg）的等效量,即18.75g/kg进行灌胃。采用10%水合氯醛,腹腔注射麻醉,腹主动脉采血,室温静置30min,予3000r/min,离心15min后取上清液。56℃、30 min水浴灭活,0.22μm微孔滤膜滤过除菌,分装,-20℃保存备用。1.4细胞实验:细胞实验采用H9c2心肌细胞系采用oxygen-glucose deprivation/re-oxygenation（OGD/R）方法建立心肌细胞（H/R）模型将上述细胞培养基改为无血清/葡萄糖的DMEM。细胞在厌氧条件下（94%N2,5%CO2和1%O2）培养,并在37℃下维持6小时。复氧条件为95%O2、5%CO2,6小时。待细胞长满后调整细胞浓度为1×10 ~5cells/m L,接种于96孔板,每孔100μl,培养24h;将H9c2细胞随机分为4组,空白组:H9C2细胞组;模型组:OGD/R组;低剂量组:OGD/R组+5%含药血清组;高剂量组:OGD/R组+15%含药血清组;采用CCK-8检测细胞活性;TUNEL法检测心肌组织细胞凋亡,计算心肌细胞凋亡率;流式细胞检测细胞凋亡及ROS含量;ELASA法检测LDH、SOD、MDA、cGMP含量;western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3、PKG1蛋白表达;PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3基因表达。2、临床研究:选取2022年01月至2022年7月间就诊于黑龙江中医药大学附属第一医院心血管三科门诊的稳定型心绞痛患者62例,且为气滞血瘀证型。随机分为对照组31例,治疗组31例。对照组按照西医标准方案治疗;治疗组在对照组基础上给予血府逐瘀汤,疗程为4周,两组各有1例患者因未按照规定要求用药而剔除。实际完成30例。在治疗前后对中医症候积分、心绞痛积分进行比较,检测治疗前后患者血清中ROS、MDA、SOD水平变化,并对药物安全性进行监测。结果:1、网络药理学:我们在TCMSP、TCMID以及BATMAN-TCM数据库中获得血府逐瘀汤有效成分179种对应对应靶点基因80个;在Drug Bank、Gene Card、OMIM、Disgenet四个数据库获得疾病靶点6273个;将两者进行合并后获得交集靶基因64个。经过String数据库进行PPI网络构建及拓扑分析显示有ESR1、PTGS2、NR3C1、GSK3B、PPARG、MAOB、ADRB2、NOS3、MAPK14、MAOA、AR、ADRA2A、PTGS1、ACHE、DRD1、ESR2、OPRM1、DPP4、NR3C2和AKR1B1等20个基因关联性最强;GO分析显示:依据P值大小影响生物学功能的生物学过程BP包括:循环系统血管功能、调节微管尺寸、调节血管尺寸、调节微管大小等;细胞组分CC包括:突触前膜组成部分、突触前膜固有成分、突触后膜的整体成分、突触后膜过成分、膜阀、膜微区、突触后膜、膜区等;分子功能MF包括:多巴胺结合、甾体激素受体激活、G蛋白偶联受体的活性、核受体活性、转录因子活性、神经递质受体活性等;KEGG分析发现cGMP-PKG、神经活性配体与受体的相互作用、钙信号通路等通路相关。2.动物试验:2.1 HE染色:空白组心肌细胞为长条状、排列整齐,HE染色后呈现为蓝紫色,细胞质呈现为粉红色。成纤维细胞经HE染色后表现为深蓝色,胞质红染;与空白组相比模型组心肌细胞排列增粗、紊乱、间隙较疏松并且伴有空泡形成,且细胞间质能够看见炎症细胞浸润等病理变化。经过血府逐瘀汤处理后无论是低剂量组还是高剂量组与模型组相比较上述病理表现均有改善。2.2 TUNEL:空白组凋亡指数为:6.06±0.88%;模型组心肌细胞凋亡指数为:33.90±2.22%;低剂量组为:24.68±0.68%;高剂量组凋亡指数为:20.80±0,61%;与空白组比较模型组凋亡指数明显增加（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组凋亡指数明显降低（P＜0.05）。2.3 ELISA:与空白组比较模型组cTnI、CK、CK-MB、LDH、MDA水平显著增高（P＜0.05）;SOD、cGMP水平显著降低（P＜0.05）;与模型组比较低剂量和高剂量组cTnI、CK、CK-MB、LDH、MDA含量明显下降（P＜0.05）;SOD、cGMP含量明显升高（P＜0.05）2.4 Westen blot:与空白组比较模型组心肌组织中Bax、Cleaved-caspase3蛋白表达明显增高（P＜0.05）;Bcl-2、PKG1蛋白表达明显降低（P＜0.05）;与模型组比较低剂量、高剂量组Bax、Cleaved-caspase-3蛋白含量显著降低（P＜0.05）;Bcl-2、PKG1显著增高（P＜0.05）。2.5 RT-PCR:与空白组比较模型组心肌组织中Bax基因表达明显增高（P＜0.05）;Bcl-2基因表达明显降低（P＜0.05）;与模型组比较高剂量组Bcl-2基因表达明显升高（P＜0.05）,低剂量组比较无统计学意义（P＞0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组Bax基因表达均显著下降（P＜0.05）;caspase-3基因表达在各组间无明显差异（P＞0.05）;3、细胞试验:3.1 CCK-8检测细胞活性:空白组H9c2细胞为长梭形贴壁密集生长;模型组细胞形态发生明显变化,镜下可见形态不规则;含药血清组细胞密度及形态均好转;空白组细胞活性为0.65±0.10,模型组为:0.40±0.08,低剂量组为0.53±0.07,高剂量组为0.62±0.1。与空白组比较模型组细胞活性明显下降（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组细胞活性明显恢复（P＜0.05）;3.2流式细胞检测细胞凋亡:与空白组比较模型组细胞凋亡细胞明显升高（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组细胞凋亡明显减轻（P＜0.05）;3.3流式细胞检测ROS含量:与空白组比较模型组细胞内ROS含量明显升高（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组ROS含量显著降低（P＜0.05）、3.4 TUNEL实验:与空白组比较模型组H9c2细胞凋亡明显增加（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组细胞凋亡明显改善（P＜0.05）;3.5 ELISA:与空白组比较模型组大鼠LDH、MDA水平明显升高（P＜0.05）;SOD、cGMP水平明显降低（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组LDH、MDA含量显著下降（P＜0.05）;SOD、cGMP含量明显升高（P＜0.05）3.6 Westen blot:与空白组比较模型组大鼠心肌组织中Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增高（P＜0.05）;Bcl-2、PKG1蛋白表达显著降低（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组和高剂量组Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著降低（P＜0.05）;Bcl-2、PKG1蛋白表达明显升高（P＜0.05）。3.7 RT-PCR:与空白组比较模型组心肌组织中Bax基因表达明显增高（P＜0.05）;Bcl-2基因表达明显降低（P＜0.05）;与模型组比较低剂量组及高剂量组Bcl-2基因表达明显升高（P＜0.05）;Bax基因表达均显著下降（P＜0.05）;caspase-3基因表达在各组间无明显差异（P＞0.05）;4、临床研究:4.1中医症候:中医症候包括胸痛、胸闷、气短、心悸、胸胁胀满五个方面。对照组和治疗组患者治疗前中医症候积分无统计学意义（P＞0.05）;给予血府逐瘀汤后治疗组较对照组中医症候积分均明显下降（P＜0.05）;对照组和治疗组中医症候的有效率分别为:70%及96.7%,两组比较具有统计学意义（P＜0.05）;4.2心绞痛疗效:心绞痛疗效评价包括引发心绞痛活动量、心绞痛发生频率、心绞痛持续时间、硝酸甘油用量四个方面。两组患者治疗前心绞痛症状积分无统计学意义（P＞0.05）;给予血府逐瘀汤后治疗组在心绞痛活动量、心绞痛发生频率及心绞痛持续时间3项积分明显低对照组（P＜0.05）;但硝酸甘油用量两组比较无统计学意义（P＞0.05）。4.3血清中ROS、SOD、MDA含量:两组患者治疗前血清中ROS、SOD、MDA含量无统计学意义（P＞0.05）;应用血府逐瘀汤后治疗组患者ROS、MDA含量明显低于空白组（P＜0.05）SOD含量明显高于空白组（P＜0.05）。结论:1.通过网络药理学分析发现血府逐瘀汤可能通过调节cGMP-PKG信号通路影响心肌细胞凋亡2.血府逐瘀汤能够减轻慢性缺血引起的心肌细胞损伤;3.血府逐瘀汤通过抑制Bax、Cleaved-caspase-3,增加Bcl-2蛋白表达减轻心肌细胞凋亡,其机制可能与调控cGMP-PKG信号通路相关。4.血府逐瘀汤能够改善稳定型心绞痛患者中医症候疗效;增加稳定型心绞痛患者活动耐量、减少患者心绞痛的发生频率、减少心绞痛发作的持续时间,且安全性良好。5.血府逐瘀汤能够降低稳定型心绞痛患者患者血清中ROS、MDA含量,增加SOD含量。