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目的:本研究旨在探究补阳还五汤(Buyang Huanwu Docoction,BHD)抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用和分子机制。本研究选用高脂饮食法建立载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠AS模型,用益气活血方药BHD进行干预,为BHD治疗AS提供理论和实验依据。方法:具有C57BL/6J背景的雄性ApoE-/-小鼠(6-8周龄)40只,适应性喂养一周,随机分为四组:空白组、模型组、BHD组和阳性药物阿托伐他汀(Atorvastatin,Ato)组,每组10只。空白组饲喂普通饲料,模型组、BHD组和Ato组给予高脂饲料;空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,BHD组给予BHD(18.53g/kg)灌胃,Ato组给予Ato(1.3mg/kg)灌胃,连续造模并给药8周。实验期间每周记录小鼠体重变化。8周造模并给药结束后,用全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平;冰冻切片及油红O染色观察主动脉弓部斑块大小及分析脂滴占比;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清细胞因子白介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β3)的浓度;免疫印迹法(Western-blot)检测M1巨噬细胞主要标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2巨噬细胞主要标记物精氨酸酶-1(Arg-1)以及巨噬细胞极化枢纽丙酮酸激酶M2(PKM2)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达水平;聚合酶链式反应(RT-PCR)检测主动脉细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10、TGF-β和糖酵解酶葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)的基因表达水平。结果:1.血脂检测结果:与空白组相比,模型组血脂TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均明显升高(P<0.001);与模型组相比,BHD组和Ato组TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均明显降低(P<0.001)。2.病理结果:与空白组相比,模型组脂滴占比明显升高(P<0.001);与模型组相比,BHD组和Ato组脂滴占比明显降低(P<0.05)。3.ELISA结果:与空白组相比,模型组中IL-1β、IL-6、TNF-α表达明显升高(P<0.01,P<0.05,P<0.001),IL-4、IL-10 表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,BHD 组 IL-1β、TNF-α表达明显下降,IL-4、IL-10表达明显升高(P<0.01,P<0.05),Ato组IL-4表达明显升高(P<0.01)。TGF-β均无明显变化。4.Western-blot结果:与空白组相比,模型组iNOS、PKM2、HIF-1α蛋白表达水平均明显升高(P<0.01,P<0.001,P<0.01),Arg-1表达水平明显降低(P<0.01);与模型组相比,BHD组和Ato组iNOS、PKM2、HIF-1α蛋白表达水平均明显降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05 或 P<0.01,P<0.01,P<0.05),Arg-1 表达水平明显升高(P<0.05)。5.RT-PCR 结果:与空白组相比,模型组 IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-oα、GLUT1、PDK1、LDHA基因表达水平明显升高(P<0.05),IL-4、IL-10、TGF-β明显降低(P<0.05);与模型组相比,BHD 组和 Ato 组 IFN-y、IL-1β、IL-6、TNF-α、GLUT1、PDK1、LDHA 基因表达水平明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001),IL-4、IL-10明显升高(P<0.05,P<0.01),TGF-β3均没有明显变化(P>0.05)。结论:BHD可降低AS模型小鼠体重和血清血脂(TC、TG、LDL-C)水平,减少主动脉斑块脂滴占比,还可降低炎症因子水平并升高抗炎因子水平,且BHD抗炎作用优于Ato其作用机制可能与调控M1/M2巨噬细胞极化枢纽PKM2/HIF-1α及其下游糖酵解酶的表达从而调节M1/M2巨噬细胞极化平衡,使巨噬细胞分化偏向M2表型,达到抗炎、促进斑块稳定性、延缓AS进展有关。