小白菊内酯抗肿瘤作用的实验研究

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小白菊内酯(parthenolide)是一种倍半萜烯内酯,分子式为C15H20O3,分子量(Mr)为248.3,西方国家曾主要用于治疗皮肤感染、风湿病和偏头疼。研究发现,许多天然植物成分能诱导肿瘤细胞凋亡,并能使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞,抑制肿瘤细胞增殖。近年来,发现小白菊内酯具有多种生物活性,并且对多种瘤株有抑制作用。据一些文献报道,它的抗癌作用可能也是通过诱导细胞凋亡,影响细胞生长来实现的。目的研究小白菊内酯抗人肝肿瘤作用,并从分子水平初步探讨其作用机制,为临床应用提供实验依据。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞,用小白菊内酯处理细胞;采用MTT比色法观察小白菊内酯对人肝癌细胞生长的影响;倒置显微镜观察形态学改变;Giemsa染色观察凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解;应用免疫组织化学方法检测相关基因P53、PCNA和NF-κB表达的情况。结果结果显示,MTT比色法表明小白菊内酯能明显抑制人肝癌BEL-7402细胞生长,呈剂量依赖性关系;倒置显微镜观察经小白菊内酯处理的BEL-7402细胞,出现皱缩、核质浓缩、核碎裂等现象;Giemsa染色观察到凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征,即“梯形”条带的出现;免疫组织化学法显示,小白菊内酯处理细胞48小时后,可抑制NF-κB活性;P53表达增强;PCNA表达减弱。结论小白菊内酯能够抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖,亦能诱导其凋亡。诱导肿瘤细胞凋亡可能是小白菊内酯抑制人肝癌细胞生长的机制之一;NF-κB可能参与小白菊内酯诱导BEL-7402细胞凋亡中的信号转导;其机制还可能与增强P53蛋白表达和抑制PCNA蛋白表达有关。
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