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目的：利用TAT-PTD的跨膜转导能力,建立新型水产疫苗输送系统,提高水产疫苗的接种效率。方法：通过基因工程的手段构建并表达重组蛋白GFP-TAT,比较GFP-TAT和GFP在细胞水平的跨膜效率、鱼浸泡免疫效果,探究TAT在水产疫苗应用中的可能性。通过基因工程的方法构建重组载体pET28a(+)-OmpK 和 pET28a(+)-OmpK-TAT,并表达两种重组蛋白。分别用这两种蛋白作为疫苗浸泡免疫欧洲鳗鲡,比较血清中的抗体效价以及免疫后对副溶血弧菌攻击的保护效果。结果：(1)利用PCR的手段克隆GFP的全序列,将TAT序列接在GFP基因序列的碳端,通过基因克隆的手段构建了重组质粒pET28a(+)-GFP-TAT,表达重组蛋白GFP-TAT,经过镍柱纯化得到(GFP-TAT蛋白；(2)分别用GFP和GFP-TAT两种蛋白孵育细胞1h,可以发现,与GFP相比,GFP-TAT能够高效、稳定的转导进入细胞内；(3)分别用GFP和GFP-TAT两种蛋白作为抗原,通过注射,口服和浸泡三种方法免疫锦鲤,免疫三周后,测定血清中抗体效价。可以发现,同种抗原免疫后,均是注射组的效价最高,浸泡组次之,而口服组最低,并且GFP-TAT浸泡组的抗体效价要高于GFP注射组的效价。TAT在浸泡免疫中能够提高GFP的免疫效果；(4)成功构建了重组质粒pET28a(+)-OmpK和pET28a(+)-OmpK-TAT,并诱导表达两种重组蛋白。通过镍柱纯化得到重组蛋白OmpK和OmpK-TAT;(5)分别用两种蛋白OmpK和OmpK-TAT作为疫苗,经过浸泡免疫的方法对欧洲鳗鲡进行接种,免疫2次后,比较两种疫苗免疫得到的抗体效价。结果表明OmpK-TAT浸泡免疫后的抗体效价是OmpK浸泡免疫组的10倍；(6)免疫后用副溶血弧菌攻击的结果表明,OmpK-TAT组的存活率明显高于OmpK组和空白组,表明在浸泡免疫中,TAT能介导OmpK更有效地进入鱼体内,提高免疫效果,增强免疫保护作用。本课题的研究结果为进一步研究并建立新型的水产疫苗输送系统奠定了基础,同时也为相关浸泡疫苗的研发提供了依据。