本室利用了生物信息学并结合分子生物学技术克隆了果蝇心脏发育基因CG3295,前期利用P因子敲除的方法成功建立了CG3295基因完全敲除系,构建了果蝇CG3295转基因品系。通过研究提示CG3295与果蝇心脏发育有关。本文进一步筛选与鉴定该基因的相互作用的蛋白,探究其在果蝇心脏发育过程的信号通路。果蝇CG3295基因（登录号：NM₁37692.3）位于果蝇2号染色体57B9-57B9区段上,它包含1个外显子,一个转录本,cDNA全长1853bp, ORF全长为1298bp,共编码432个氨基酸。该基因包含三个主要的结构域,分别为LisH、CTLH以及CRA。本室前期研究提示,果蝇CG3295、Dad, Mad 和 Smox基因之间可能存在相互作用。本文将果蝇CG3295、Dad、Mad和Smox基因先克隆到pMD18-T载体上,经酶切验证后,送到测序公司测序,证明克隆的质粒正确,再分别构建pCMV-BD-CG3295, pCMV-AD-Dad, pCMV-AD-Mad, pCMV-AD-Smox, pCMV-myc-CG3295, pCMV-tag2B-Dad, pCMV-tag2B-Mad, pCMV-tag2B-1Smox, pGEX-4t-1-Smox, pET 28a-Dad, pET-28a-Mad等质粒,通过哺乳动物细胞双杂交,CO-IP, PULL-DOWN来验证果蝇CG3295与Dad、Mad、Smox这些基因之间是否有相互作用。哺乳动物细胞双杂交实验初步提示CG3295可能与Dad存在相互作用。进一步通过双向免疫共沉淀分析CG3295与Dad是否存在相互作用。将pCMV-myc-CG32P5;和pCMV-tag2B-Dad转染HEK293细胞系,经过蛋白提取和转膜,分别利用flag和myc单克隆抗体进行westernblot实验的检测。实验结果表明CG3295和Dad蛋白全长之间有相互作用。综上所述,本文筛选与鉴定出果蝇CG3295与Dad蛋白相互作用,该研究为进一步研究CG3295在果蝇心脏发育过程中的调控机制打下了基础。