高效乙草胺降解菌的筛选、鉴定及其降解特性研究

来源 :浙江工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuguiyuan2009
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乙草胺等氯乙酰胺类除草剂在农田中的大量使用导致其在各种环境介质中被频繁检出,对人体、动物、农作物以及土壤微生物群体等非靶标生物都存在潜在的安全风险。研究乙草胺高效降解菌,探究其降解特性及代谢机理,对于乙草胺等氯乙酰胺类除草剂污染土壤或水体的修复具有一定理论意义和应用价值。从杭州某农药厂的活性污泥中筛选并分离出三株具有降解乙草胺活性的菌株,分别命名为MZ-1,MZ-2和MZ-3,其中MZ-3具有最高的降解活性,根据其生理生化特性及16S rDNA基因序列同源性分析,将其鉴定为红球菌属(Rhodococcus sp.)。菌株MZ-3能够以乙草胺为唯一碳源、氮源或能源生长。单一因素实验表明,菌株MZ-3降解乙草胺的最适条件为:pH 7.0,温度30?C:在最适条件下,菌株经过12小时的培养后能将初始浓度为200 mg/L的乙草胺降解完全;当pH值在6.0~8.0之间时,菌株对200 mg/L的乙草胺的降解效率超过90%,但当pH值小于5.0或大于9.0时,菌株的降解活性显著受到抑制,表明菌株能在偏碱性环境下高效降解乙草胺;当温度范围在20~40?C之间时,菌株的降解效率均超过80%,表明菌株对温度有很广泛的适应性。菌株MZ-3对同类除草剂甲草胺和丁草胺也具有同样的降解活性,其降解效率没有随着N-烷基侧链长短的变化而呈现明显的降解差异。菌株MZ-3对乙草胺的降解不具有明显的对映体选择性。进一步利用高效液相色谱仪(HPLC)和液质联用仪(LC-MS)研究菌株降解乙草胺的代谢过程,并且检测到一种主要的代谢产物,即2-氯-N-(2-甲基-6-乙基苯基)乙酰胺(CMEPA),初步推断其代谢途径为侧链的C-脱烷基途径。
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