玉屏风散合当归饮子对肺气虚慢性湿疹豚鼠模型的作用机制研究

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目的:基于皮毛“疏泄”与“润泽”功能及湿疹与肺的临床相关性调查研究基础,建立肺气虚慢性湿疹病证结合豚鼠模型,探讨玉屏风散合当归饮子对肺气虚慢性湿疹豚鼠模型表皮通透屏障功能障碍的调控机制。方法:将32只豚鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、氯雷他定组、玉屏风散合当归饮子组(中药组),每组8只。联合采用2,4-二硝基氯苯丙酮溶液和烟熏法建立肺气虚慢性湿疹豚鼠模型,造模成功后用玉屏风散合当归饮子水煎液灌胃14天。⑴观察豚鼠肺系症状,HE染色观察肺组织形态改变,蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测肺AQP3蛋白表达情况;⑵皮损评分评价皮损形态,多功能皮肤测试仪检测皮肤角质层含水量(Stratum corneum hydration,SCH)和经表皮水分流失量(Trans-epidermal water loss,TEWL),HE染色观察皮损区皮肤组织形态改变,尼罗红染色观察皮肤脂质含量情况,Western blot检测皮肤AQP3蛋白表达情况,酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测血清IFN-γ、IL-17、IL-31浓度。结果:⑴玉屏风散合当归饮子对模型豚鼠肺系症状变化、肺组织病理和肺AQP3表达的影响:与正常组比较,模型组豚鼠全身皮毛蓬松、杂乱、焦黄、无光泽,偶听闻豚鼠喷嚏或呛咳,豚鼠皮损区皮肤红斑,丘疹,痂皮或苔藓样变明显,或可见抓痕,豚鼠有舔舐或搔抓致敏区域行为;豚鼠肺病理显示豚鼠肺泡腔体积减小,支气管管腔狭窄,大量炎性细胞浸润;肺AQP3表达升高(P<0.05);与模型组比较,中药组豚鼠肺系症状明显改善,豚鼠肺泡、支气管结构基本恢复正常,少量炎性细胞浸润;肺AQP3表达降低(P<0.05)。⑵玉屏风散合当归饮子对模型豚鼠表皮通透屏障功能障碍的影响:与正常组比较,模型组豚鼠皮肤病理显示角质层显著增厚,棘细胞层水肿增厚,表皮突向真皮层延伸,真皮层内纤维排列紊乱,真皮乳头层可见大量炎性细胞浸润;皮肤尼罗红染色显示脂质含量减少;皮损评分、TEWL、IL-17、IL-31、皮肤AQP3表达升高(P<0.05);皮肤角质层含水量、血清IFN-γ降低(P<0.05)。与模型组比较,中药组皮肤表皮轻度角化,颗粒层、棘细胞层增生好转,炎性细胞浸润减少;皮肤尼罗红染色显示脂质含量增加;皮损评分、TEWL、IL-17、IL-31、皮肤AQP3表达降低(P<0.05);皮肤角质层含水量、血清IFN-γ升高(P<0.05)。结论:玉屏风散合当归饮子与肺气虚慢性湿疹方证一致,以方测证,其作用机制可能是通过益气养肺,调节“肺主皮毛”的生理功能,改善豚鼠肺系症状、肺组织病理形态和肺AQP3表达;通过疏泄肌表,养血润燥调节皮毛“疏泄”与“润泽”功能,改善皮肤组织病理形态,减少经表皮水分流失量,提高皮肤角质层含水量和脂质含量,调节血清IFN-γ、IL-17、IL-31细胞因子和皮肤AQP3的表达来修复和改善表皮通透屏障功能,为临床从肺论治湿疹提供了研究依据。
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