组织工程骨修复兔股骨头坏死模型的实验研究

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【目的】制备组织工程骨(BCBB/BMP/bFGF/MSCs)和微波灭活兔股骨头坏死模型,模拟临床上开窗减压植骨术治疗股骨头坏死的过程,移植该组织工程骨修复兔股骨头坏死,评价其对股骨头坏死的成骨和成血管性能及其修复效果,为进一步研究提供实验依据。 【方法】 本研究分为四个部分。 第一部分,微波灭活兔股骨头坏死模型的建立。成年新西兰大白兔48只96侧股骨头,将微波天线插入股骨头灭活,根据微波灭活的不同温度和时间随机分为4组,每组24侧股骨头。A组:50℃、10min;B组:55℃、10min;C组:55℃、20min:D组:60℃、10min。分别于术后即刻、1w、2w、4w、8w和12w取材,每个时间点每组取材4侧股骨头,采用X线、MRI和组织学观察坏死和修复情况,确定最佳灭活温度和灭活时间。 第二部分,双相陶瓷生物骨(Biphasic ceramic biologic bone,BCBB)的制备。取新鲜市售猪椎骨制成一侧含皮质骨的松质骨条,先用低温煅烧的方法制备出陶瓷化骨(True bone ceramic,TBC),再将TBC与焦磷酸钠溶液(Na4P2O7·10H2O,NP)复合后低温煅烧,制得主要成分为羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)和磷酸三钙(Tricalcium phosphate,TCP)的BCBB。进行扫描电镜观察、材料成分分析、抗压强度测试。 第三部分,双相陶瓷生物活性骨(BCBB/BMP/bFGF)的制备及细胞相容性研究。将有骨诱导活性和成血管性能的骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)与BCBB复合。分离培养兔骨髓基质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)。取密度为1×106/mL的第三代MSCs与双相陶瓷生物活性骨复合培养,采用倒置相差显微镜、扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM)观察以及细胞增殖曲线检测。 第四部分,组织工程骨修复兔股骨头坏死模型的实验研究。成年新西兰大白
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