大麦芽活性多糖的分离及结构解析

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大麦(Hordeum vulgare L.)为禾本科一年生草本植物大麦的果实,麦芽为发芽的大麦颖果经干燥而成,是一种药食同源性传统中草药。现代医学研究表明,大麦芽具有降血糖、降血脂、抗氧化等作用。本文以大麦芽为研究材料,对其活性多糖进行如下研究:1.以四氧嘧啶糖尿病小鼠为模型,考察大麦芽中水提取物、30%乙醇提取物、70%乙醇提取物、乙酸乙酯提取物的降血糖活性,得出大麦芽水提取物可以显著降低小鼠空腹血糖。对水提取物进一步分离及活性检测,得出大麦芽中可显著降低小鼠空腹血糖的主要成分为粗多糖。2.以水为提取溶剂,以粗多糖得率为研究指标,研究了大麦芽粗多糖的水提工艺,通过单因素实验得出水提工艺的最佳条件为:提取温度40℃,提取时间3h,提取次数3次,液固比8:1,在此条件下,大麦芽粗多糖的得率为8.90‰。3.大麦芽粗多糖经DEAE-cellulose、HW-55F、Sephacryl S-400柱层析纯化,分离得到两种大麦芽多糖BP I和BP II。通过Sephadex G-100凝胶柱和高效凝胶渗透色谱法鉴定多糖BP I和BP II均为单一组分。BP I为白色粉末,无甜味,无挥发性,易溶于水,难溶于乙醇、乙醚和丙酮,与苯酚-硫酸试剂反应呈阳性,与碘-碘化钾作用和考马斯亮蓝反应均呈阴性。BP II为略带棕色的白色粉末,无甜味,无挥发性,易溶于水,难溶于乙醇、乙醚和丙酮,与苯酚-硫酸试剂反应呈阳性,与碘-碘化钾作用和考马斯亮蓝反应均呈阴性。4.高效凝胶渗透色谱测定多糖BP I和BP II的平均分子量,分别约为1.33×104和1.04×104;气相色谱分析表明多糖BP I和BP II均为均一多糖;BP I单糖与标准单糖的保留时间皆不一致,BP II的单糖组成只含有半乳糖。采用1H-NMR、13C-NMR、135DEPT-NMR谱图分析,明确其糖基种类、连接方式以及其他结构特点。BP I由呋喃葡萄糖组成,呋喃葡萄糖分子以1→3键相连,α和β构型交替出现,无侧链。BP II为半乳糖分子以1→4键相连形成主链,另有一个半乳糖分子连在主链糖分子的C-6位上,形成侧链。
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