环丙沙星、土霉素以及双甲脒是三种常用的农兽药物,具有广谱抗菌性,常用于禽畜和水产养殖中动物的疾病防御和治疗,但过度使用易导致残留,会对动物及人体产生严重的毒副作用。因此建立方便、快速、灵敏度高的农兽药物残留分析检测法,保障我国食品质量安全和人类身体健康具有重要意义。表面增强拉曼光谱(SERS)是一种以拉曼光谱为基础,借助纳米材料表面特殊光学性能,而获得物质分子指纹信息的新型光谱分析技术,具有灵敏度高、检测时间短、操作方便等优点,正越来越多的应用于抗生素等农兽药物的检测上。本研究的主要目的是以SERS技术为检测手段,结合纳米活性基底的合成技术,实现对环丙沙星、土霉素以及双甲脒的快速高效检测。具体如下:采用化学还原和自组装法分别制备了具有SERS活性的Au纳米粒子、Ag纳米粒子、Ag溶胶膜以及Au@Ag核壳双金属纳米粒子,并通过紫外可见吸收光谱、能谱、透射电镜及扫描电镜对其结构和形貌进行了表征。对三种农兽药分子分别进行密度泛函理论(DFT)计算和立体结构优化,获得理论拉曼光谱,并与其固体粉末常规拉曼光谱(NRS)进行比对,确定了三种农兽药分子主要拉曼峰振动的归属。以Ag纳米粒子为活性基底对环丙沙星进行SERS分析与检测,实验表明,当环丙沙星与Ag溶胶体积比为20:10,加入的团聚剂浓度为80 mmol/L以及两者混合30 min,处于半风干状态时,环丙沙星的SERS信号最强。在最佳实验条件下,环丙沙星SERS特征峰强度与其浓度在0.1~4μg/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.083μg/mL。对河水样进行了测定,回收率为82.0~100.4%,RSD≤6.12%。因Ag纳米粒子对土霉素的SERS增强效应并不好,故选择SERS活性更强的Ag溶胶膜为增强基底对土霉素进行测定,并对Ag溶胶膜的制备条件进行优化和选择,确定了Ag溶胶pH为6,自组装时间为6 h所形成的Ag溶胶膜具有最好的SERS增强效应。在最佳实验条件下,土霉素SERS特征峰强与其浓度在0.08~2μg/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.068μg/mL。对河水样进行了测定,回收率为79.5~94.9%,RSD在3.60~5.75%之间,结果比较理想。最后以Au@Ag核壳双金属纳米粒子为SERS增强基底对双甲脒进行检测。通过改变制备液中Ag/Au的摩尔比合成了Ag壳厚度不同的Au@Ag纳米粒子,结果表明,Ag/Au摩尔比为6:5即Ag壳厚度为6 nm时Au@Ag纳米粒子对双甲脒的SERS增强效应最佳,要明显强于单纯的Ag、Au溶胶纳米粒子。进一步对影响双甲脒SERS强度的因素进行了考察,确定了以乙醇为溶剂,Au@Ag纳米粒子与双甲脒体积比为20:10,加入的团聚剂浓度为25 mmol/L时,双甲脒的SERS信号最强。在最佳实验条件下,双甲脒SERS特征峰强度与其浓度在0.977~29.3μg/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.66μg/mL。对牛奶样品中的双甲脒进行了测定,回收率为81.7~100.5%,RSD在2.61~5.51%之间,结果满意,为双甲脒的分析检测提供了新方法。