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本实验通过构建表达2.2kbLAT的真核表达载体pVAX-LAT，使其在SH-SY5Y神经细胞中瞬时表达，为后续在HSV-2低滴度情况下，模拟人体内神经节中LAT的大量表达，抗神经细胞凋亡的实验，提供了实验基础。
从疱疹病毒Ⅱ型基因组里，PCR扩增出长为3200 bp的LAT基因。由于HSV-2LAT基因GC含量高(达78％)，且二级结构复杂，因此不易扩增，也不易直接连接。因此研究选用LAT基因与pVAX载体共有的BamH Ⅰ酶切位点，将LAT基因分为HindⅢ-BamH Ⅰ(1200bp)和BamH Ⅰ-Pst Ⅰ(2000bp)两段，分段克隆，并设计两对含相应酶切位点的引物，以一次PCR扩增的LAT基因为模板，PCR扩增获得LAT全长基因的两分段产物HindⅢ-BamH I和BamH Ⅰ-Pst Ⅰ，分别连接至pVAX载体中，构建两个表达载体pVAX-HindⅢ-BamH Ⅰ和pVAX-BamH Ⅰ-Pst Ⅰ。重组载体采用通用引物进行序列测定分析，与Genebank中的NC 001798进行比对。鉴定构建成功后，双酶切pVAX-HindⅢ.BamH Ⅰ中的HindⅢ-BamH Ⅰ片段，将其按顺序连入pVAx-BamHⅠ-PstⅠ载体中，构建pVAX-LAT载体。将构建好的pVAX-LAT载体瞬时转染SH-SY5Y细胞，RT-PCR验证LAT基因在神经细胞里的转录情况。RT-PCR结果显示pVAX-LAT瞬时转染SH-SY5Y神经细胞成功，LAT可在神经细胞内转录。