丹酚酸B、C分子药对配伍对肾纤维化炎症趋化因子CCL2、CCL3的影响

来源 :遵义医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wcf2009
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目的:研究丹酚酸B、C分子药对配伍对肾纤维化过程中炎症细胞趋化因子CCL2、CCL3的抑制作用。方法:采用50只健康雄性SD大鼠随机分为五组,即正常组(n=10),模型组(n=10),丹酚酸B组(n=10),丹酚酸C组(n=10),丹酚酸B、C按1:1配伍组(简称:丹酚酸B+C组,n=10)。除正常组外,其余大鼠均造成单侧输尿管梗阻(UUO)模型,即麻醉后打开腹腔结扎右侧输尿管。正常组和模型组予双蒸水灌胃,其余各治疗组予相应药物灌胃治疗14天,全自动生化分析仪检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),ELISA法检测尿2-微球蛋白(2-MicrogloBulin,2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)的含量,光镜下观察肾组织病理、胶原沉积,免疫组化法检测肾组织内Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化,Western-Blotting技术检测肾组织单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)和巨噬细胞炎症蛋白-3α(CCL3)的表达。结果:1.各组大鼠肾脏病理结果(1)HE染色结果正常组大鼠肾组织未见病理改变,UUO组大鼠肾组织可见肾小管上皮细胞大量萎缩空泡变性,管腔扩张或断裂,并可见肾间质内大量炎性细胞浸润,间质纤维化较明显;与模型组比较,各治疗组HE评分显著降低(P<0.05);各治疗组间比较,丹酚酸B、B+C组HE评分明显低于丹酚酸C组(P<0.05)。(2)Masson染色结果正常组肾组织胶原沉积不明显,模型组可见肾小囊、肾小管基膜及间质出现明显的丝状淡蓝色胶原沉积,各治疗组胶原沉积较模型组均明显减轻(P<0.05)。丹酚酸B+C组Masson评分较丹酚酸C组明显减少(P<0.05)。2.肾功能测定结果与正常组比较,模型组及各治疗组血清Scr和BUN水平均有不同程度升高,说明UUO大鼠肾功能受损。与模型组比较,丹酚酸C组血清Scr水平明显降低(P<0.05)。各治疗组间比较,丹酚酸C组血清Scr水平明显低于丹酚酸B+C组(P<0.05)。3.尿2-MG、NAG检测结果与正常组比较,模型组及各治疗组尿2-MG、NAG蛋白水平显著升高(P<0.05),说明UUO大鼠肾小管功能受损。与模型组比较,各治疗组尿2-MG、NAG水平显著降低(P<0.05),说明丹酚酸B、C分子药对配伍对UUO大鼠肾小管功能有一定保护作用。各治疗组间比较,差异无统计学意义。4.免疫组化检测结果与正常组比较,模型组ColⅠ、Col Ⅲ、α-SMA平均光密度值显著升高(P<0.05);与模型组比较,丹酚酸B、B+C组ColⅠ、Col Ⅲ及各治疗组α-SMA平均光密度值显著降低(P<0.05);各治疗组间比较,丹酚酸B、B+C组ColⅠ平均光密度值显著低于丹酚酸C组(P<0.05),丹酚酸B+C组Col Ⅲ、α-SMA平均光密度值显著低于丹酚酸C组(P<0.05)。5. Western-Blotting检测结果与正常组比较,模型组CCL2和CCL3相对表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组CCL2、CCL3相对表达显著降低(P<0.05),各治疗组间比较,丹酚酸B+C组较丹酚酸B、C组CCL2相对表达显著降低(P<0.05),CCL3的相对表达各治疗组间差异无统计学意义(P>0.05),说明丹酚酸B、C分子药对配伍可在一定程度上抑制炎症细胞趋化因子CCL2、CCL3的表达。结论:丹酚酸B、C分子药对配伍对UUO大鼠肾脏具有一定的保护作用,可一定程度改善肾功能及肾脏病理变化,有效减少ColⅠ、Col Ⅲ和α-SMA在UUO大鼠肾组织中的表达,从而延缓慢性肾脏病的进展,其机制可能与其抑制CCL2和CCL3在肾纤维化中的表达有关。
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