山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)为山茱萸科(Cornaceae)山茱萸属(Macrocarpium)植物,属落叶灌木或乔木。山茱萸是我国传统的名贵中药,其味酸、涩,微温,归肝、肾经,具有补益肝肾、涩精固脱的功效,临床上常用于治疗眩晕耳鸣、大汗虚脱、内热消渴、腰膝酸痛、尿遗尿频、阳痿遗精、崩漏带下等。目前对山茱萸药材质量标准的研究主要集中在有效化学成分的含量方面,关于山茱萸商品规格等级的研究较少,对山茱萸的商品规格等级划分没有统一的参考标准。本文以产于河南、陕西、浙江的山茱萸为研究对象,对不同等级的山茱萸样品进行性状、化学及生物活性的评价,探讨山茱萸的商品等级与性状、化学指标及生物活性之间的关系,制定新的山茱萸商品规格等级标准。(1)根据表面颜色、质地、杂质等将收集到的66批山茱萸药材初步划分为4个等级,在此基础上,测定并记录果皮颜色及厚度。(2)采用HPLC法同时测定山茱萸药材中马钱苷和莫诺苷的含量;采用冷浸法、加热回流提取、超声提取的方法分别得到浸出物、水提物、50%乙醇提取和95%乙醇提取物,并分别计算各自的含量;采用紫外-可见分光光度法测定样品中总色素、总环烯醚萜苷、总酚酸、总多糖的含量;采用DPPH法和SOD试剂盒法评价山茱萸水提物的体外抗氧化活性;通过脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7模型,考察山茱萸水提物对LPS所致RAW 264.7细胞中NO生成量的影响,从而评价其抗炎活性。(3)运用SPSS统计分析软件对测定数据进行分析,探索性分析标记各测定指标中的异常值、检测各指标的正态性;因子分析法将1 1个化学测定指标整合成3个公因子,并分别命名为指标成分因子、提取物因子和大类成分因子;分析活性指标与3个公因子、性状指标与3个公因子、性状指标与活性指标的非参数相关Spearman系数,从而确定了 8个显著性相关指标;选择8个相关指标,经过多次优化组合,对山茱萸样品进行聚类分析,通过平均连接树状图得到山茱萸样品的重新分类结果,参考多变量组合的分类结果进行微调,得到新的山茱萸样品分级结果;以聚类分析结果为依据,对所有测定指标进行判别分析,得到分级函数。最后根据以上优化结果,拟订出新的山茱萸药材分级标准。