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红椿(Toona ciliata),隶属于楝科(Meliaceae)香椿属(Toona),是国家Ⅱ级重点保护的珍贵野生植物之一。本文以红椿优良种源无菌种子苗为对象,选择不同外植体,包括子叶、下胚轴及叶片,以MS培养基为基本培养基,获取最适激素配比,进行愈伤组织诱导、愈伤分化及生根培养条件的优化,建立一套成熟、高效的再生体系,为进行红椿的遗传转化体系奠定基础,为后续进行红椿基因工程改造创造条件。本研究主要结果如下:1、将红椿种子双侧翅去除,浸水3-5 h之后,用75%的酒精消毒1 min结合7.5%次氯酸钠(NaClO)处理20 min灭菌效果最好,污染率仅为5.33%,且萌发率最高,达92.67%。2、红椿子叶愈伤诱导最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.05 mg/L NAA,最高诱导率为69.33%;叶片愈伤诱导最适培养基为MS+3 mg/L 6-BA+1 mg/L KT+0.05 mg/L NAA,最高诱导率为85.33%;下胚轴愈伤诱导最适培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+1 mg/L KT+0.1mg/L IBA,最高诱导率为68.67%。3、不同基因型外植体愈伤组织诱导效果差异显著。在子叶愈伤诱导最适培养基中,基因型为ZY4的子叶愈伤诱导率最高可达到100%,但基因型ZY1的子叶愈伤诱导分化率为0;在叶片愈伤诱导最适培养基中,基因型为YP5的红椿叶片愈伤诱导率最低,为3.33%,基因型YP4的叶片愈伤诱导率最高,可达96.67%;在下胚轴愈伤诱导最适培养基中,基因型为XPZ3的红椿下胚轴愈伤诱导率最低为6.67%,XPZ4的下胚轴愈伤诱导率最高,可达96.67%。4、光照及不同放置方式对红椿不同外植体愈伤组织诱导影响显著。在不同外置体各自最适愈伤诱导培养基中,12 h光照+12 h暗处理的条件下,不同外植体愈伤诱导率均高于24 h暗处理时的愈伤诱导率,子叶、叶片、下胚轴的愈伤诱导率分别为53.33%、90.67%、66.67%;子叶、叶片以近轴面靠近培养基的方式培养分别获得69.33%及89.33%的愈伤诱导率,下胚轴以水平放置的方式在培养基中进行培养可获得73.33%的愈伤诱导率。5、通过激素配比优化,子叶愈伤分化最佳培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最高愈伤分化率达57.78%;叶片愈伤分化最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,最高愈伤分化率达60.00%;下胚轴愈伤分化最佳培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最高愈伤分化率达48.89%。6、红椿不定芽生根最佳培养基为1/2MS+0.1 mg/L NAA;当红椿不定根长至4 cm左右后,进行培养基冲洗及开盖炼苗,炼苗后的红椿再生苗移入灭菌的泥炭土:蛭石=2:1的混合基质中,20 d后统计成活率可达到88.89%。7、通过石蜡切片观察,红椿无菌种子苗叶片从产生愈伤到分化的整个过程首先是由叶片切口处表皮细胞大量分裂形成愈伤,之后愈伤开始逐渐分化增长,形成芽点,随后芽点细胞分裂逐步发育形成不定芽。