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目的:采用瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠模型,观察苏木对以上大鼠模型的作用特点,研究其双向适用的特征,探讨平性药苏木的药性特征。 方法:1造模:120只大鼠随机分为2组,分别为正常组、角叉菜胶加干酵母组,每组10只。角叉菜胶加干酵母组腹腔注射浓度为10mg/mL角叉菜胶溶液,5mL/kg,连续3天,末次注射角叉菜胶24h后,皮下注射20%的活性干酵母溶液,10mL/kg造成大鼠瘀热互结证模型;25只大鼠随机分为模型组(n=20)和正常对照组(n=5),模型组又随机分为1.5h、3h、6h、12h4个时间点,每个时间点5只大鼠。除正常组外,其余各组大鼠臵于特制鼠笼内,然后臵于-18±2℃冰柜连续冷冻,2h/次,2次/天,连续7天,造成寒凝血瘀证模型。 2药效学研究:72只雄性大鼠随机分为5组,分别为正常组、模型组、平性药苏木组、寒性药大黄组、热性药三七组,其中模型组24只,其余各组12只。瘀热互结证造模完成后,6h后测量各组大鼠体温,然后,水合氯醛麻醉大鼠,对大鼠进行图像采集、量取大鼠全尾长度和瘀血长度,选取大鼠的耳廓进行微血管流速和流态的观察,腹主动脉取血5 mL,肝素抗凝,进行血流变各项指标的观察;寒凝血瘀证造模最后一次冷冻完12h后,做与热证相同的指标测定。 3机理研究:观察苏木对寒、热两种血瘀证大鼠血浆中活性物质ADP、5-HT、ET的作用特点,即腹主动脉取血5mL,肝素抗凝,4000rmp/min离心8min后,分离血浆,采用酶联免疫吸附法,按照试剂盒说明书中的操作步骤和要求测定血浆中ADP、5-HT、ET的含量。 结果:1角叉菜胶加干酵母组大鼠全血高、中、低切黏度、红细胞聚集指数、血沉方程 K值、红细胞电泳时间、卡松黏度、纤维蛋白原等血流变指标均明显升高,血液呈“浓”、“粘”、“凝”、“聚”状态,大鼠表现出明显的“瘀”和“热”的中医表征。全身冷冻的方法建立的寒凝血瘀证大鼠模型在不同的观察时间点大鼠均出现畏寒喜暖,蜷缩少动,朦胧欲睡,唇周发黑,耳色黯红,爪尾部紫黯,舌黯红等寒凝血瘀证的中医表征,也出现血液流变性异常、微循环障碍等实验室检查的异常表现。 2平性药苏木药性特征的药效学研究 2.1对瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠模型中医表征的影响:①瘀热互结证:寒性药大黄能够降低瘀热互结证大鼠体温,平性药苏木、血竭及热性药三七对体温影响不明显;平性药苏木能够明显缩短大鼠尾部瘀血的长度(p<0.05),热性药三七有增加尾部瘀血长度的趋势;②寒凝血瘀证:平性药苏木对寒凝血瘀证大鼠的舌质颜色R、G、B比值有一定的改善作用或改善趋势。 2.2对瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠模型微循环的影响:①瘀热互结证:平性药苏木能明显升高血液流速(p<0.05);寒性药大黄能明显升高血液流速(p<0.01);热性药三七对流速和流态均没有明显改善作用和趋势。②寒凝血瘀证:平性药苏木能明显升高血液流速(p<0.05),热性药三七有升高趋势。 2.3对瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠血液流变学的影响:①瘀热互结证:平性药苏木、寒性药大黄、热性药三七均能够显著改善血液流变学状态(p<0.01或p<0.05)。②寒凝血瘀证:平性药苏木、热性药三七均能显著改善血液流变学状态(p<0.05)。 3平性药苏木对瘀热互结证和寒凝血瘀证大鼠活性物质作用的研究3.1对瘀热互结证大鼠血浆中ADP、5-HT、ET的影响:苏木能明显降低大鼠血浆中的ADP、5-HT的浓度(p<0.01)。 3.2对寒凝血瘀证大鼠血浆中ADP、5-HT、ET的影响:苏木能明显降低大鼠血浆中5-HT的浓度(p<0.05),有降低大鼠血浆中ADP、ET浓度的趋势。 结论:1采用注射角叉菜胶和干酵母的方法建立的瘀热互结证大鼠模型以及采用全身冷冻的方法建立的寒凝血瘀证大鼠模型,具有中医表征明显、稳定性好、易操作等特点,适用于中药药性的评价。 2平性药苏木有改善瘀热互结证大鼠的中医体征、微循环、血液流变学等指标的药效作用,同时,也有改善寒凝血瘀证大鼠的各项相同指标的药效作用,证明了平性药苏木具有双向适用性。