【摘 要】
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甘蔗是世界上重要的糖料作物和具有很大发展潜力的生物质能源作物。由甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitanminea)引起的甘蔗鞭黑穗病是严重影响甘蔗产量和质量的重要病害之一,给甘蔗产业造成巨大损失。甘蔗鞭黑粉菌侵入后在甘蔗体内生长,传统化学农药难于进入甘蔗体内,防治效果差,且对环境造成很大污染。为了开发甘蔗鞭黑穗病生防技术,本论文以抑制甘蔗鞭黑粉菌生长或有性配合为目标,自甘蔗根际土壤和甘
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甘蔗是世界上重要的糖料作物和具有很大发展潜力的生物质能源作物。由甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitanminea)引起的甘蔗鞭黑穗病是严重影响甘蔗产量和质量的重要病害之一,给甘蔗产业造成巨大损失。甘蔗鞭黑粉菌侵入后在甘蔗体内生长,传统化学农药难于进入甘蔗体内,防治效果差,且对环境造成很大污染。为了开发甘蔗鞭黑穗病生防技术,本论文以抑制甘蔗鞭黑粉菌生长或有性配合为目标,自甘蔗根际土壤和甘蔗内生细菌各筛选获得1株效果明显拮抗菌株,对其活性物质进行了分离和鉴定;同时自生物源小分子库选出的14个筛选得到倍半萜类化合物法尼醇,并对该物质与3种内吸杀菌剂协同增效作用进行了测试。主要研究结果如下:通过稀释分离自甘蔗根际土壤分离细菌菌株150个,经4轮筛选获得了1株对甘蔗鞭黑粉菌有显著抑制作用的假单胞菌(Pseudomonas.sp)菌株LC4-1;其发酵液的乙酸乙酯萃取粗提物能抑制甘蔗鞭黑粉菌的有性配合及菌丝延伸,此外该菌株也产生具有挥发性抑菌活性的物质。对粗提物通过分离纯化,获得一个单一化合物,经核磁共振分析与质谱比对,鉴定为吩嗪-1-羧酸(C13H8N2O2),其在LB培养基28℃培养24小时条件下的产率为40mg/L。通过梯度分离培养从甘蔗茎秆内分离菌株80个,经3次筛选获得了1株对甘蔗鞭黑粉菌有显著抑制作用的芽孢杆菌(Bacillus)菌株A52-1;其发酵液的硫酸铵沉淀和乙酸乙酯萃取粗提物均抑制甘蔗鞭黑粉菌的生长和有性配合,其中萃取组分活性稳定。对萃取粗提物通过液相色谱仪分离纯化得到的单一产物,经质谱比对和核磁共振检测鉴定该物质参考分子式为C17H18N2。通过对已知生物源小分子物质库选取的14个物质进行筛选,发现法尼醇对甘蔗鞭黑粉菌生活史不同阶段都具有明显抑制作用。在法尼醇0.5μM的处理中,冬孢子萌发率降低50%以上,担孢子存活率低于20%,;在0.04μM法尼醇的处理下可显著抑制甘蔗鞭黑粉菌的有性配合和减少菌丝的形成,显示出其具有开发成为甘蔗鞭黑粉菌新型杀菌剂的潜能。为此,将法尼醇与目前防治真菌病害常选用的3种内吸杀菌剂嘧菌酯、苯醚甲环唑、己唑醇进行协同增效测试,0.15μM的法尼醇与嘧菌酯混配的增效比达到34倍,与苯醚甲环唑混配增效比达到74倍,与己唑醇混配增效比达到59倍,显著提高杀菌剂的药效,从而达到同样抑菌效果下大大降低了杀菌剂的用量。
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