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目的:引导骨再生技术(Guided Bone Regeneration,GBR)的出现,为局部牙槽骨缺损的患者行种植义齿修复提供了可能。目前,GBR已成为一种常规的牙种植辅助技术,可改善缺牙区骨组织的质量和数量,以满足种植体的植入条件。而屏障膜在GBR技术中起着重要作用。本研究将壳聚糖和胶原以不同比例混合,通过机械性能测试、体外细胞增殖实验和动物体内埋植实验对其进行物理性能、生物相容性及降解性研究,以期将自主研发的壳聚糖-胶原可吸收膜应用于牙种植引导骨再生技术。方法:(1)将2%的低分子量壳聚糖(MW50,000~190,000)冰乙酸溶液与0.3%的胶原水溶液以体积比2:1、1:1、1:2(定义为A,B,C组)混合,加入1%的NaOH溶液调节混合液至pH呈中性,混合液经4℃静置过夜除气泡、-20℃冷冻24h和-80℃预冻12h后,采用冻干法制备A、B、C三组壳聚糖-胶原膜。通过拉伸实验和压汞实验研究膜的物理性能。用扫描电镜观察比较冻干膜与Bio-Gide膜表面形态的差异。(2)将2%的低分子量壳聚糖冰乙酸溶液(CHS-L)、1%的中分子量壳聚糖(MW190,000~310,000)冰乙酸溶液(CHS-M)及0.1%的胶原(MW300,000)冰乙酸溶液(COL)分别透析至溶液pH呈中性。分别将CHS-L和CHS-M与COL以2:1和4:1的体积比混合,得到四种混合液。混合液经4℃静置过夜除气泡、-20℃冷冻48h和-80℃预冻24h后,采用冻干法制备壳聚糖-胶原膜。将膜裁剪至所需大小后,独立包装EO灭菌。(3)将灭菌膜片浸入配好的细胞培养液中,膜表面积与培养液比例为6cm2/ml,用膜浸提液和常规细胞培养液培养MC3T3-E1细胞,采用MTT实验评价膜对细胞增殖活性的影响。(4)将灭菌膜片植入8只新西兰兔的背部皮下组织内,手术后1周、2周、4周、8周各随机处死2只动物,取出剩余膜材料。通过计算膜植入前后的质量差测定膜在动物体内的降解率。结果:(1)低分子量壳聚糖冰乙酸溶液与胶原水溶液混合制备的A(2:1)、B(1:1)、C(1:2)三组冻干膜,以2:1和1:1比例制备的膜成膜效果较好,以1:2比例制备的膜成膜效果较差(不进行物理性能评价)。拉伸实验结果表明,以2:1比例制备的膜机械性能优于1:1比例制备的膜;压汞实验显示,以2:1和1:1比例制备的膜存在广泛的孔隙,孔隙率分别为89.41%和83.92%;通过扫描电镜观察,2:1和1:1比例制备的两组冻干膜孔隙均较Bio-Gide膜大。(2)2%的低分子量壳聚糖冰乙酸溶液、1%的中分子量壳聚糖冰乙酸溶液和0.1%的胶原冰乙酸溶液分别透析至溶液呈中性后,未见絮状物质析出。壳聚糖溶液可与胶原溶液均匀混合,混合液经真空冻干可制成膜。两种中分子量壳聚糖冻干膜的厚度和密度,均大于低分子量壳聚糖制备的冻干膜。(3)中分子量壳聚糖制备的两种冻干膜,对小鼠MC3T3-E1细胞增殖无抑制。壳聚糖与胶原体积比为4:1时,其浸提液对MC3T3-El细胞的增殖表现出显著的促进作用,特别是从第4天开始,OD490值明显高于对照组(P<0.01);壳聚糖与胶原体积比为2:1时,其浸提液对MC3T3-E1细胞增殖无显著影响,OD490值仅稍高于对照组(P>0.05)。(4)皮下埋植实验显示,两种中分子量壳聚糖-胶原冻干膜植入动物皮下组织后未见明显的炎症反应。两种壳聚糖-胶原冻干膜在动物体内可降解吸收。8周时,壳聚糖-胶原冻干膜(2:1和4:1)的降解率分别为43.83%和26.45%,但未降解的膜材料已破碎或溶胀呈浆状。结论:(1)壳聚糖和胶原混合制备的冻干膜有较好的物理性能和生物相容性。(2)中分子量壳聚糖(MW190,000-310,000)和胶原的冰乙酸溶液分别透析至中性后以体积比4:1混合,经真空冻干制备的复合可吸收膜,具有良好的成膜性、生物相容性及生物降解性,具备了应用于引导骨再生技术的基本条件。