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目的:研究1,25(OH)2D3对2型糖尿病伴牙周炎患者中性粒细胞趋化、凋亡等功能的影响,以期为2型糖尿病合并牙周炎的发生、发展及临床治疗提供理论和实验依据。方法:1.严格按照2型糖尿病合并牙周炎的纳入标准选择44例患者作为研究对象。实验分为1,25(OH)2D3未干预组和1,25(OH)2D3干预组,按其作用浓度的不同又分为以下三组:10-6 mol/L、10-8 mol/L、10-10 mol/L干预组。2.采用密度梯度离心法分离2型糖尿病伴牙周炎患者外周血中性粒细胞(Polymorphonuclear leukocytes,PMN),瑞氏-姬姆萨染色及台盼蓝拒染实验分别鉴定细胞纯度和检测细胞活力。3.采用不同浓度1,25(OH)2D3作用于PMN 24h后,分别运用Transwell系统检测PMN趋化、迁移能力;流式细胞术(FCM)检测PMN凋亡率及细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的生成量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的含量变化。结果:1.成功分离2型糖尿病伴牙周炎患者外周血PMN,瑞氏-姬姆萨染色示细胞纯度≥96%,台盼蓝染色示细胞活力>98%。2.不同浓度1,25(OH)2D3作用于PMN 24h,趋化剂甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)趋化2h后发现,与1,25(OH)2D3未干预组相比,10-6 mol/L、10-8 mol/L 1,25(OH)2D3干预组PMN趋化功能增强,差异有统计学意义(P<0.05),而10-10 mol/L 1,25(OH)2D3干预组与1,25(OH)2D3未干预组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。10-6mol/L、10-8 mol/L、10-10 mol/L干预组两两比较发现,10-6 mol/L干预组>10-8 mol/L干预组>10-10 mol/L干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.不同浓度1,25(OH)2D3作用于PMN 24h后,流式细胞术(FCM)检测PMN凋亡率及细胞内ROS生成量的结果显示,与1,25(OH)2D3未干预组相比,1,25(OH)2D3干预组PMN凋亡率均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。1,25(OH)2D3干预组两两比较发现,10-8 mol/L干预组>10-6 mol/L干预组>10-10mol/L干预组,差异有统计学意义(P<0.05);细胞内ROS的检测显示,与1,25(OH)2D3未干预组相比10-6 mol/L 1,25(OH)2D3干预组ROS的生成量增加,10-8 mol/L、10-10 mol/L 1,25(OH)2D3干预组ROS的生成量减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.ELISA检测PMN上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、NE的结果显示,1,25(OH)2D3干预组TNF-α、IL-1β、IL-6、NE的水平均较未干预组低,差异有统计学意义(P<0.05)。1,25(OH)2D3干预组两两比较发现,10-8 mol/L干预组<10-6 mol/L干预组,10-8 mol/L干预组<10-10 mol/L干预组,差异有统计学意义(P<0.05),而10-6 mol/L干预组与10-10 mol/L干预组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以上实验结果表明一定浓度的1,25(OH)2D3对2型糖尿病伴牙周炎患者外周血PMN的趋化、凋亡等功能均有一定影响。由此可以推测1,25(OH)2D3作为一种免疫调节剂在2型糖尿病伴牙周炎的发生、发展中起免疫调节作用,但具体机制研究尚有待于进一步澄清。