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目的:研究不同组织学类型、病理分级和临床分期的上皮性卵巢癌组织,良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织中Bmi-1、Caspase-8蛋白表达情况,探讨Bmi-1、Caspase-8基因表达与卵巢肿瘤组织的良恶性和卵巢癌的组织学类型、病理分级及临床分期等卵巢癌恶性生物学行为的相关性;选用卵巢癌细胞系SKOV3、3AO作为临床两种不同病理类型卵巢癌代表,奥沙利铂作为化疗干预措施,分析Bmi-1,Caspase-8基因在卵巢癌细胞系化疗药物干预前后的表达变化特点,探讨Bmi-1、Caspase-8表达与卵巢癌化疗后监测之间的相关性。以求在卵巢癌早期诊断、复发监测、疗效观察及预后判断中寻找到较可靠的肿瘤标记物提供临床试验证据。方法:1、采用免疫组织化学技术SABC法,检测60例上皮性卵巢癌组织、16例良性卵巢肿瘤组织、10例正常卵巢组织中Bmi-1、Caspase-8的表达。已知阳性石蜡切片(乳腺癌)作为阳性对照,PBS液代替一抗作为阴性对照。2、采用细胞培养技术、MTT法检测不同浓度奥沙利铂对人卵巢癌细胞株SKOV3、3AO增殖抑制的影响,并确定中效浓度(IC50)。3、采用细胞培养技术、免疫细胞化学技术(SABC法)和RT-PCR技术检测经奥沙利铂作用前后人卵巢癌细胞株SKOV3、3AO中Bmi-1、Caspase-8表达的变化。结果:1.卵巢癌组织中Bmi-1、Caspase-8蛋白表达:⑴Bmi-1基因在卵巢癌组织中的阳性表达率是68.3%,显著高于良性卵巢肿瘤组织(37.5%)和正常卵巢组织(10.0%)中的表达,差异有显著性(P<0.05);Bmi-1表达与卵巢癌组织类型、临床分期有关,在浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌表达率高于子宫内膜样癌(P<0.05),且随临床分期增高阳性表达率增高(P<0.05),但与病理分级无关(P>0.05)。⑵Caspase-8基因在卵巢癌组织中的阳性表达率是31.7%,显著低于良性卵巢肿瘤组织(68.8%)和正常卵巢组织(90.0%)中的表达,差异有显著性(P<0.05);Caspase-8表达与卵巢癌病理分级、临床分期均有关,随病理分级增高阳性表达率也增高(P<0.05),临床分期增高阳性表达率减低(P<0.05),但与组织类型无关(P>0.05)。⑶Bmi-1、Caspase-8表达与卵巢癌患者年龄、血清CA125值和腹水均无关(P>0.05)。2.奥沙利铂对卵巢癌SKOV3、3AO细胞增殖的影响:在3.125～50 ug/ml浓度范围内,奥沙利铂对卵巢癌SKOV3、3AO的生长抑制具有时间和浓度依赖性(P<0.001)。3.Bmi-1、Caspase-8在卵巢癌细胞系SKOV3、3AO中表达:在卵巢癌SKOV3、3AO细胞中,经奥沙利铂作用前后Bmi-1、Caspase-8均呈阳性表达,Bmi-1表达降低,Caspase-8表达增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.卵巢癌组织中Bmi-1、Caspase-8表达的相关性分析:Bmi-1、Caspase-8在卵巢癌组织中表达相关系数为r = 0.296,且呈负相关关系。结论:1. Bmi-1基因在卵巢癌组织中的阳性表达显著高于良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达,提示该基因表达增强可能参与了卵巢癌的发生发展。在浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌中的表达高于内膜样癌,且随临床分期增高阳性表达率增高,在组织学类型和临床分期的差异表达提示该基因可能成为临床早期诊断的候选指标。但该基因表达与病理分级无关,可能与样本量有关,尚需进一步实验证实。Bmi-1表达与卵巢癌患者的年龄、有无腹水和术前血清CA125值无明显相关。2. Caspase-8基因在卵巢癌组织中的阳性表达率显著低于良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达,提示该基因表达减弱可能参与了卵巢癌的发生发展。Caspase-8表达随病理分级增高阳性表达率也增高,临床分期增高阳性表达率减低,但与组织类型无关。Caspase-8表达减低可能提供卵巢癌早期诊断线索。Caspase-8表达与卵巢癌患者年龄、血清CA125值和腹水均无关。3. Bmi-1与Caspase-8在卵巢癌组织中表达呈负相关。Bmi-1表达过度,Caspase-8表达减低可能提示肿瘤细胞增殖异常活跃,导致恶性肿瘤发生。二者联合检测是否可作为卵巢癌早期诊断的分子生物学指标,尚待进一步证实。4.在3.125～50ug/ml浓度范围内,奥沙利铂对卵巢癌SKOV3、3AO的生长抑制具有时间和浓度依赖性,作为实验干预措施科学可靠。5.奥沙利铂药物干预前后的卵巢癌细胞系SKOV3、3AO中均可以检测到Bmi-1基因的表达,经药物处理后Bmi-1基因表达减弱。Bmi-1基因化疗干预后表达减弱可能提示化疗显效,化疗后再现高表达的Bmi-1可能预示卵巢癌的复发。6.卵巢癌细胞株SKOV3、3AO中经奥沙利铂药物处理后Caspase-8基因表达高于未经药物处理的对照组。提示化疗药物可能激活Caspase-8基因诱导肿瘤细胞凋亡。Caspase-8的表达减弱或缺失很可能对预示卵巢癌化疗后复发起到指示性作用。