结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)是引起结核病的致病菌,能够逃避宿主的免疫监控并在细胞中潜伏,最终导致结核病。在病原菌感染和致病过程中,效应蛋白常常发挥关键作用。但是,有关Mtb的效应蛋白及其与宿主细胞之间的分子相互作用目前还知之甚少。本论文广泛筛选和初步发现了一批Mtb分泌蛋白,并在此基础上对其中一个新的分泌蛋白(命名为MhpA)与巨噬细胞之间的相互作用进行了详细研究。主要结果包括两个方面:(1)以耻垢分枝杆菌为载体菌株,广泛筛选和比较了446个Mtb潜在分泌蛋白对分枝杆菌感染巨噬细胞引起细胞因子分泌变化的调控影响。采用高通量的多因子检测技术(CBA)测定了耻垢分枝杆菌重组菌株侵染RAW264.7细胞和THP-1细胞24h后培养基上清中几个重要细胞因子的分泌量。通过多轮筛选,我们发现:33个分泌蛋白显著影响RAW264.7中重要细胞因子的释放量,32个显著影响THP-1中重要细胞因子的释放量,另外有20个基因同时显著影响两种不用巨噬细胞中重要细胞因子的释放量。(2)发现了新分泌蛋白MhpA在Mtb H37Ra侵染巨噬细胞中显著促进IL-6的释放和增强分枝杆菌在宿主细胞内的存活。首先,我们成功构建了H37Ra的MhpA敲除菌株及其互补菌株。随后,通过比较野生型菌株、敲除菌株和互补菌株,我们发现:MhpA敲除菌株侵染小鼠RAW264.7后,细胞IL-6的表达量明显降低,表明MhpA在分枝杆菌侵染巨噬细胞过程中能够促进IL-6的表达。进一步,通过坏死检测及细胞凋亡实验发现:MhpA敲除菌株感染巨噬细胞过程中引起的细胞坏死程度显著低于野生型菌株和互补菌株。最后,通过测定胞内存活率发现:与野生型菌株和互补菌株相比,MhpA敲除菌株的胞内存活率明显降低,说明MhpA有利于分枝杆菌在宿主细胞内的存活。这些工作为进一步探讨结核分枝杆菌与宿主细胞之间的分子相互作用机制提供了重要线索。