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白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)是一种拥有多种生物活性的因子,在免疫系统中,IL-4作为 Th2免疫反应过程中的关键性的细胞因子发挥着重要的作用。然而,在硬骨鱼类中关于 IL-4功能的研究一直很少报道。在这项研究中,我们克隆到了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)IL-4/13B的基因序列,并命名为 CiIL-4/13B。克隆到的CiIL-4/13B基因序列全长包含464个核苷酸残基(nucleotides,nt),其中包括一个开放阅读框(open reading frame,ORF),这个开放阅读框由408个氨基酸残基组成,翻译后的多肽分子量大小为15.5 kDa。多重序列比对结果显示CiIL-4/13B与鲤鱼(Cyprinus carpio)IL-4/13B的相似性最高,为49%。在所有待检测的组织和外周血淋巴细胞中都能检测到CiIL-4/13B mRNA的表达,其中外周血淋巴细胞和腮中的mRNA含量最高。在嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染后的草鱼中所有组织和外周血淋巴细胞中 CiIL-4/13B mRNA表达量均显著上升。利用原核表达和蛋白纯化等手段成功制备了草鱼的去掉信号肽的成熟的IL-4/13B蛋白,并利用得到的重组蛋白制备了多克隆抗体。蛋白免疫印迹结果分析显示,草鱼血清中的天然 IL-4/13B蛋白存在糖基化,并且在蛋白水平上证明嗜水气单胞菌感染的草鱼血清中 IL-4/13B蛋白的表达量在实验期间是越来越高的。体外实验中,重组草鱼 IL-4/13B蛋白(rCiIL-4/13B)能够显著抑制炎性细胞因子的释放、单核/巨噬细胞(MO/MФ)吞噬的能力。此外,动物保护试验的结果显示,适量的rCiIL-4/13B蛋白可以显著提高嗜水气单胞菌感染后的草鱼存活率。同时,组织载菌量实验结果显示,rCiIL-4/13B蛋白可以减少草鱼的肝、脾、肾和血组织中细菌的数量,进而改善整个受细菌感染的微环境。本实验第一次揭示了鱼类MO/MФ和 IL-4/13B之间的调控关系。综上,CiIL-4/13B表达量会在草鱼受感染后迅速上升,并且能够抑制早期炎症反应且调控草鱼 MO/MФ对嗜水气单胞菌的的吞噬作用。