论文部分内容阅读
组织微环境在肿瘤的起始和转移过程中有重要作用。不仅肿瘤原发部位的原正常组织微环境在中后期通过转化为肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)促进原发肿瘤的增殖和侵袭,而且转移靶器官的组织微环境在转移灶形成前即可能转变为转移前微环境(pre-metastatic niche),形成一个适宜循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)生长的环境(也可称为癌前利基),通过分泌细胞因子等诱使CTCs其在该位点定植、生长并形成继发病灶,从而促进恶性肿瘤的转移。外泌体(exosome)是最近研究发现的调控转移前微环境形成的重要因子。在胰腺癌肝转移、黑色素瘤肺转移等小鼠模型中,都证明了肿瘤细胞来源外泌体(tumor-cell-derived-exosomes,TEXs)通过促进转移前微环境的形成加速肿瘤转移,但死亡率较高的肠癌肝转移中目前尚未有相关研究。为了研究肠癌细胞外泌体及其内容物microRNA对肠癌肝转移的影响,我们建立了不同转移能力的细胞株脾脏接种的肠癌肝转移小鼠移植瘤模型,通过脾脏接种肿瘤细胞前持续尾静脉注射外泌体,观察肠癌细胞外泌体对转移靶器官组织微环境的影响和作用。我们发现肠癌细胞外泌体能够被肝组织巨噬细胞摄取并吸收,高转移力的肠癌细胞株外泌体(SW620-exo)能够诱导肝组织正常微环境转变为炎性微环境,且促进肠癌肝转移,而相同剂量的低转移细胞株外泌体则无此作用。然后我们通过miRNA高通量深度测序分析不同转移力肠癌细胞外泌体中microRNA表达谱差异,筛选出与转移相关的候选microRNA,其中miR-17在高转移细胞株中表达明显上调。再利用qPCR方法验证高低转移细胞株、以及临床样本外周血血清外泌体中miR-17的表达水平,发现其表达水平与肠癌转移显著相关。体外实验表明,miR-17可能通过结合TLR8激活NF-κB等下游通路,活化巨噬细胞,促进IL1-β、IL-6、TNF-a等前炎性因子的表达。本研究揭示了肠癌细胞外泌体可能通过该机制促进肝组织转移前微环境的形成,从而加速肿瘤转移,并筛选出转移关外泌体miR-17作为转移发生标志物,为临床诊断和预后提供参考。