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[研究背景]系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)是一种典型的自身免疫病,全身多系统多器官均可受累,该病临床表现复杂、病程迁延反复,其病理特征是体内多种自身抗体和免疫复合物的形成和沉积,从而导致剧烈的炎症反应和组织损害,造成机体多个靶组织损伤并表现出多种相应的临床症状和体征。A20 蛋白是 TNFAIP3(tumor necrosis factor alpha Induced protein 3)基因所编码的一种锌指蛋白。经全基因组关联及候选基因研究表明TNFAIP3(A20)是SLE的易感基因,A20的异常表达与SLE的发病关系密切,提示该基因在调节SLE自身免疫炎症反应方面发挥着重要作用。p38MAPK和NF-κ B在自身免疫、炎症和细胞凋亡中发挥着重要作用,激活后可诱导大量如IL-6、TNF-α等炎症细胞因子表达,使机体产生炎症反应。A20可通过多种途径负性调节p38MAPK和NF-κB信号通路的活性,如Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)所激活的p38MAPK和NF-κ B活化的过程中,A20可通过泛素化和去泛素化修饰作用抑制其激活。研究发现TLR2、4在SLE患者PBMC中表达明显高于健康人群,提示TLR2、4在调节SLE机体炎症反应中发挥着不可忽视的作用。因此,A20的异常表达可能通过调节TLR2、4-p38MAPK/NF-κ B信号通路的活性,进一步诱发SLE持续的炎症反应和组织损伤。[目的]TLR2、4-p38MAPK/NF-κ B信号通路是否积极参与了系统性红斑狼疮的发病;研究高表达的A20是否能通过调节TLR2、4-p38MAPK/NF-κ B信号通路对系统性红斑狼疮模型小鼠的病情有缓解作用。[方法]4-5周龄MRL/1pr和BALB/c雌性小鼠,随机将两类小鼠分为BALB/c小鼠阴性对照组(Sham;n=18)、MRL/lpr小鼠未处理组(SLE;n=18)、MRL/lpr小鼠瑞香素处理组(Daphnetin;n=18)。给药期间注重观察各组小鼠毛发及体重的变化以及生存率。给药结束后,利用考马斯亮蓝法测尿蛋白及试剂盒检测血尿素氮水平;酶联免疫吸附实验检测血清anti-DNA IgG、IL-6和TNF-α水平;蛋白质印迹法检测外周血单个核细胞中A20、TLR2、TLR4、pp38MAPK和pNFκB-p65蛋白表达水平。采用卡方检验分析比较三组小鼠的生存率以及利用单因素方差分析(one-way ANOVA)统计组间差异,结果以均数±标准差(x±s)表示。[结果]经瑞香素处理后Daphnetin组较SLE组小鼠A20表达显著上调,SLE组与阴性对照组小鼠A20表达无显著差别;Western blot还显示SLE组小鼠TLR2、TLR4、pp38MAPK和pNF κB-p65蛋白表达水平明显比阴性对照组升高,而Daphnetin组小鼠TLR2、TLR4、pp38MAPK和pNF κB-p65蛋白表达水平明显降低;Elisa结果表明IL-6和TNF-α水平SLE组比阴性对照组显著升高,Daphnetin组小鼠IL-6和TNF-α水平较SLE组小鼠显著下调;其次小鼠血清anti-DNA IgG和血尿素氮以及24小时尿液白蛋白水平检测表明SLE组比阴性对照组明显升高,Daphnetin组血清anti-DNA IgG和血尿素氮以及24小时尿液白蛋白水平比SLE组明显降低;另外,从小鼠一般情况来看,SLE组小鼠外形消瘦,毛发凌乱、脱落、干枯无光泽,而Daphnetin组小鼠状态较好,同阴性对照组小鼠毛发依然顺滑、有光泽,无明显脱落;在实验过程中SLE组小鼠6只死亡,Daphnetin组小鼠2只死亡,阴性对照组小鼠无一死亡。[结论]TLR2、4-p38MAPK/NF-κ B信号通路积极参与了系统性红斑狼疮的发病;高表达的A20对狼疮模型小鼠具有保护作用。高表达的A20通过抑制TLR2、4-p38MAPK/NF-κ B信号传导通路可能是其缓解SLE病情的机制之一。