论文部分内容阅读
目的：通过检测食管鳞状细胞癌组织(Esophageal squamous cell carcinoma ESCC)和癌旁组织(Esophageal squamous cell pericarcinous ESCP) mTOR和raptor的表达水平,同时检测ESC患者外周血T细胞中mTOR和mTOR上游分子TSC2的表达水平,以及ESC患者外周血调节性T细胞的比例,比较ESCC和ESCP中mTOR的表达水平以及这些分子的表达与患者的性别、年龄的相关性,比较健康人与ESC患者T淋巴细胞分型及mTOR的表达情况,判断mTOR信号通路在肿瘤细胞中和淋巴细胞中发挥的作用。方法：收集40例食管鳞状细胞癌术后的ESCC和ESCP,分别进行组织学分型,并记录每个患者的临床信息,同时平行收集这些患者的外周血,分离血清和外周血单个核淋巴细胞(Peripheral blood mononuclear cells PBMCs)。通过免疫组织化学染色方法分析ESCC和ESCP mTOR蛋白水平的表达。通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)力法检测ESCC和ESCP中mTOR和raptor的mRNA水平的表达。通过流式细胞术(FACS)方法检测40例ESC患者外周血CD3+T和CD4+T细胞比例、CD4+CD25+CD127+调节性T淋巴细胞(Regulatory T cells Treg)比例,以及CD3+T细胞内mTOR信号通路分子--磷酸化结节性硬化复合物-2(tuberous sclerosis complex 2, p-TSC2)、磷酸化mTOR (p-mTOR)的表达水平。结果：免疫组织化学结果显示ESCC中mTOR蛋白的表达量明显高于ESCP, RT-PCR显示ESCC(Ratio=2.2±0.014,1.8±0.03)中mTOR和raptor的表达量高于ESCP(Ratio=0.3±0.009,0.4±0.019),并具有统计学意义(P<0.05)。FACS结果显示患者CD4+T (29.3 ±0.12)、 CD3+T (63.7±0.25)细胞占PBMC的比例比正常人CD4+T (38.9±0.27)、 CD3+T (74.7±0.17)细胞的略低,没有统计学差异。ESC患者CD4+CD25+CD127+调节性T细胞比例(8.5±0.21)比正常人CD4+CD25+CD127+调节性T细胞比例(3.1±0.29)高,有统计学差异(P<0.01)。P-TSC2在ESC患者外周血CD3+T细胞内的表达量为49.73±0.49,明显高于正常人的16.10±0.04(P<0.05)。p-mTOR在ESC患者外周血CD3+T细胞内的表达量为13.90±0.32,显著高于正常人的2.92±1.09(P<0.05)。结论：肿瘤细胞和淋巴细胞内的mTOR及其复合体都发挥着促进肿瘤细胞生长的同向作用,并且T细胞中的mTOR及其复合体促肿瘤发生的可能机制是通过诱导T细胞向Treg方向分化实现的。