第一部分^99mTc-tetrofosmin SPECT肿瘤断层显像评价鼻咽癌治疗疗效的研究目的:通过对鼻咽癌患者治疗不同时期的^99mTc-tetrofosmin（TF）SPECT断层显像,观察^99mTc-TF对鼻咽癌的检出能力,并通过观察其在鼻咽癌放化疗后不同时期在肿瘤部位的浓聚情况,研究其评价鼻咽癌治疗效果的能力及时机,从而为临床上用99mTc-TF诊断鼻咽癌及观察其放化疗疗效提供研究基础。方法:1.盐城市第一人民医院收治的鼻咽癌患者20例,全部患者均经病理证实为鼻咽癌,行^99mTc-TF SPECT断层显像。同期在本院行心肌灌注显像的5例患者作为对照组。2.患者分别在治疗前及治疗初期（<11.5Gy）、治疗中期（初期显像后放疗5次以上）及治疗后（放疗总剂量>66Gy）行^99mTc-TF SPECT显像;3.计算早期显像的T/N比值作为^99mTc-TF显像摄取指数（MUI）,利用2小时延迟显像获得99Tcm-TF延迟显像摄取指数（DUI）,同时计算滞留率（RI）。RI=（DUI-MUI）/MUI×100%。以接受器工作特性曲线（ROC）分析确定MUI判别阈值,评价^99mTc-TF SPECT对鼻咽癌早期放化疗疗效评估的价值。4.实验结果均采用均数±标准差（x±S）表示,数据分析采用SPSS19.0软件,进行单因素方差分析（ANOVA）或者t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.20例患者中11例患者为治疗前患者,9例患者为治疗初期患者。11例治疗前患者的MUI为8.74±2.43,而9例治疗初期患者的MUI为6.78±3.17,两者之间差异无统计学意义（P>0.05）;11例治疗前患者的DUI为10.41±2.36,9例治疗初期患者的DUI为8.39±3.49,两者之间差异也无统计学意义（P>0.05）。20例鼻咽癌患者治疗前及治疗初期MUI为7.86±2.89,DUI为9.50±3.02,延迟显像摄取指数明显上升,差异有统计学意义（P<0.01）。早期显像病灶部位与对侧鼻咽部比值为1.57±0.27,对照组早期显像两侧鼻咽部比值为1.14±0.09,两组之间差异有统计学意义（P<0.01）;延迟显像病灶部位与对侧鼻咽部比值为1.66±0.25,较早期显像增高,两组之间差异有统计学意义（P<0.05）。2.18例鼻咽癌患者治疗中期SPECT显像MUI为5.92±1.55,DUI为7.29±2.11。18例早期及延迟皆显像的鼻咽癌患者延迟显像摄取指数较早期显像明显上升,差异有统计学意义（P<0.01）。18例治疗中期患者的早期显像MUI较治疗前降低,两组之间差异有统计学意义（P<0.01）;19例治疗中期患者的延迟显像DUI较治疗初期也明显降低,两组之间差异有统计学意义（P<0.01）。3.18例鼻咽癌患者治疗结束SPECT显像MUI为5.01±1.95,DUI为6.11±2.70,延迟显像较早期显像摄取指数明显上升,差异有统计学意义（P<0.01）。MUI和DUI与治疗初期显像比较,明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）;与治疗中期显像比较,差异无统计学意义（P>0.05）。17例早、中、晚期皆行早期及延迟显像的患者治疗不同时期滞留指数分别为0.22±0.05、0.19±0.07及0.19±0.08,三者之间差异无统计学意义。结论:鼻咽肿瘤部位出现较对侧及脑部增高的放射性摄取,随着时间的延长,肿瘤部位摄取也增加;治疗中期显像示肿瘤部位放射性摄取较治疗前及治疗早期降低,但与治疗后期结果没有明显差异。本研究证实了^99mTc–TF可用于鼻咽癌显像,并可为临床早期评价鼻咽癌放疗疗效提供一种新的检查方法。第二部分^99mTc-tetrofosmin细胞结合早期评价鼻咽癌细胞放疗疗效的试验研究目的:通过测定放疗前及不同剂量放疗后24h的^99mTc-TF细胞结合率,与肿瘤增殖指标比较分析,从细胞学水平验证^99mTc-TF早期观察鼻咽癌放疗疗效的可行性。方法:1.用胰酶消化细胞、计数并接种,培养24h后弃去上清,加入3.7KBq（50μL）99mTc-TF,放置37℃继续培养100min,随后吸去上清液加入上清管;用胰酶消化细胞,收集后加入细胞管;用γ测量仪测量细胞的CPM计数及上清液CPM计数,计算99mTc-TF的细胞结合率。空白实验管不含细胞,作为非特异性吸附。2.将CNE-1细胞接种在细胞培养瓶中,培养24h后,各组分别给予0、2、4、8 Gy单次照射,24h后测量每瓶细胞^99mTc-TF细胞结合率。3.在四块96孔板上接种细胞,培养24h至细胞贴壁后,各组分别给予0、2、4、8 Gy单次照射24h后,分别取出96孔板,每孔加入MTT试剂反应4h,加150μL DMSO反应15min,在酶标分析仪上于492nm波长检测光密度（OD）值,计算细胞生长抑制率。4.接种细胞培养24h待细胞贴壁后,各组分别给予0、2、4、8 Gy单次照射,再培养24h后消化并收集细胞,用70%的乙醇溶液4℃固定24h,加入500μL的Binding Buffer悬浮细胞,再加入5μL Annexin V-FITC,继续加入5μL PI,混匀;室温避光反应15min;用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率。5.实验数据均采用均数±标准差（x±s）表示,采用SPSS19.0软件进行完全随机设计的单因素方差分析,照射剂量与其他参数相关性采用Spearman相关检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.接受不同剂量照射后24h,与对照组相比,照射各组的OD值均出现下降,2、4及8Gy组细胞生长抑制率分别为（7.14±1.86）%、（17.44±2.21）%及（33.54±3.51）%,各组之间差异均有统计学意义（P<0.05）。细胞生长抑制率随照射剂量的加大而增加,两者呈正相关（r=0.945,P<0.01）。2.不同剂量射线照射CNE-1细胞后24h,与对照组比较,流式细胞仪测定细胞早期凋亡率明显增高,各组之间差异有统计学意义（P<0.01）;细胞早期凋亡率随着照射剂量的增加而增加,两者呈正相关（r=0.969,P<0.01）。3.不同剂量照射CNE-1细胞24h后,4Gy和8Gy组^99mTc-TF细胞结合率比对照组降低,差异有统计学意义（P<0.01）;8Gy组^99mTc-TF细胞结合率较2Gy和4Gy组降低,差异有统计学意义（P<0.05）;^99mTc-TF细胞结合率随照射剂量的增加而降低,两者呈负相关（r=-0.805,P<0.01）。结论:CNE-1细胞经不同剂量射线照射后24h,细胞生长受到抑制,早期凋亡率和细胞生长抑制率随照射剂量的增加而增加,^99mTc-TF细胞结合率出现降低,与细胞生长抑制率呈负相关,从细胞学水平证实^99mTc-TF可以早期评价鼻咽癌放疗疗效。