荣昌猪DNA甲基化水平的差异分析

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lawrenceccc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本试验用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测了不同体重阶段(10kg、20kg、35kg、50kg、80kg、100kg)荣昌猪阉公猪肝脏、心脏和腰大肌三种组织的DNA甲基化水平,探讨了这三种组织在不同体重阶段基因组DNA甲基化水平的变化规律,为正确认识生长发育过程中的表观遗传调控作用提供基础数据。研究结果如下:1.HPLC技术体系的建立与优化用核酸酶T1纯化后的DNA,高温解链后在核酸酶P1和牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)的作用下水解为单一的脱氧核苷混合物,通过2′-脱氧胞苷(dC)、2′-脱氧腺苷(dA)、2′-脱氧鸟苷(dG)、2′-脱氧胸苷(dr)和5-甲基脱氧胞苷(5-mc)五种脱氧核苷混合的标准品进行对比,且进行了平行试验的测定,各平行组之间变异系数接近。得出最优化的色谱条件为色谱柱:symmetryshieldTM RP18柱(150×3.9mm,5μm);流动相:0.1%(v/v)磷酸(H3PO4),并用三乙胺调pH值为3.0;流速:1.0mL/mim检测器波长:273nm;柱温:25℃;灵敏度:2.0000AUFS;进样量20μL。方法简便可靠,20min内可完全分离。2.基因组DNA甲基化水平在不同生长发育阶段和不同组织间的变化趋势DNA甲基化水平表现出随体重增加逐渐降低的变化趋势。10kg体重阶段DNA甲基化水平极显著高于其余各体重阶段(p<0.01);20kg体重阶段DNA甲基化水平极显著高于80kg、100kg体重阶段(p<0.01);35kg、50kg和80kg体重阶段DNA甲基化水平极显著高于100kg体重阶段(p<0.01);其余体重阶段间DNA甲基化水平差异不显著(p>0.05)。体重与肝脏、心脏和腰大肌组织中DNA甲基化水平的一元线性回归方程为:腰大肌y=-0.000241x+0.0419(R2=0.4677),肝脏y=-0.000174x+0.0363(R2=0.5679),心脏y=-0.000155x+0.0346(R2=0.3514)。组织类型、体重以及它们的交互作用对DNA甲基化水平均有极显著影响(p<0.01),贡献大小顺序为组织(η2=0.395)>体重(η2=0.393)>组织*体重(η2=0.157)。不同组织类型DNA甲基化水平下降的顺序为腰大肌>肝脏>心脏。
其他文献
为推动高校伙食社会化改革进程,学习借鉴发达国家高校餐饮管理经验,在市教委支持下,北京高校伙食专业委员会组织的考察团一行14入(成员为来自北京大学、人民大学、民族大学、
应激反应激活下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,导致下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、垂体分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)和肾上腺皮质分泌糖皮质激素(GCs)水平升高。卵母细胞是繁殖
目的:探讨妊娠合并心脏病患者妊娠对心脏的影响及治疗.方法:选取我院收治的妊娠合并心脏病患者30例,节育与妊娠指征终止妊娠的方法措施进行分析.结果:心电图改变心律失常20例
目的:探讨使用腹腔镜诊治异位妊娠的临床效果.方法:选取2013年2月至2016年8月我院收治的120例输卵管妊娠患者为研究对象,采取腹腔镜探查术及腹腔引流管手术的方式,对探查到异
目的:探讨平面内与平面外相结合超声引导穿刺颈内静脉穿刺置术的优越性与实用性.方法:选择择期手术患者60例,随机分为三组:Ⅰ组使用平面内超声引导技术进行颈内静脉穿刺置管;
目的:对比观察腹部B超检查法和阴道B超检查法诊断妇产科急腹症的准确性.方法:随机抽取我院2015年11月-2016年11月收治的120例妇产科急腹症患者为研究对象,临床医生下由临床医
目的:分析探讨不同用药方案对于幽门螺杆菌(Hp)感染性胃溃疡的治疗效果.方法:选取我院在2015年4月-2017年4所收治的100例Hp感染性胃溃疡患者作为研究对象,将其随机分为研究组
目的:本文就多巴酚丁胺在新生儿持续肺动脉高压治疗中的应用效果进行研究及探讨.方法:选取2015年3月至2016年6月期间在我院接受治疗的30例持续肺动脉高压新生儿,按照抽签法分
目的:对帕金森病患者精神障碍的临床特点进行探究并分析其相关影响因素.方法:择取与2007年NINDS/NIMH制定的帕金森病患者精神障碍诊断标准相符的79例帕金森病患者作为本次研
目的:比较分析手术、激光及冷冻三种方法治疗皮肤色素痣的临床疗效.方法:选取2015年3月—2016年7月期间我院皮肤科门诊收治的240例皮肤色素痣患者,随机分为甲组、乙组和丙组