基因转染骨髓间质干细胞构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hu_jie
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目的:探索行之有效的增强组织工程心脏瓣膜(TEHV)种子细胞黏附力的方法。方法:(1)纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCBD64)的原核表达、提取和纯化。(2)FnCBD64基因重组腺病毒载体Ad.FnCBD64的构建。(3)骨髓间质干细胞(BMSCS)的分离、培养及Ad.FnCBD64转染BMSCS后FnCBD64蛋白表达、分泌。(4)预涂FnCBD64及转染FnCBD64基因增强骨髓间质干细胞黏附力的研究。结果:Ad.FnCBD64转染BMSCS后有明显的FnCBD64蛋白表达、分泌。96孔板预涂重组FnCBD64蛋白后黏附的BMSCS明显增多。预涂重组FnCBD64蛋白和BMSCS转染Ad.FnCBD64后,用于二维构建去细胞猪主动脉瓣叶,BMSCS在去细胞瓣叶上紧贴瓣叶表面呈复层生长,形成连续细胞层,黏附的BMSCS数量明显增加。整体构建的TEHV当经受体外脉动高速流体冲刷后,BMSCS残留较对照组明显增多,而转染Ad.FnCBD64组BMSCS黏附数量更多。结论:预涂FnCBD64能明显促进BMSCS在去细胞猪主动脉瓣膜上的黏附和增殖,转染Ad.FnCBD64效果更好。
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