论文部分内容阅读
糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)为糖尿病(diabetes mellitus, DM)常见慢性并发症之一,是一种特异性心肌病,心肌细胞外基质积聚和心肌间质重构为其特征性的形态学改变。DCM的发病是由多种因素如糖脂代谢紊乱、细胞因子及生长因子表达或活性增强等综合作用的结果。组织型转谷氨酰胺酶(tissuetransglutaminase, tTG)在组织器官纤维化中的作用近年来已引起人们广泛的关注。tTG属于转谷氨酰胺酶家族,能催化细胞外基质蛋白谷氨酰胺残基与赖氨酸残基间的转谷氨酰胺反应,使纤维连接蛋白、胶原纤维、层粘连蛋白等发生绞联,形成稳固结构而抵抗基质金属蛋白酶等的降解,tTG被认为是组织器官纤维化发生发展中的重要因子。研究证实,单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠及糖尿病大鼠肾脏组织中tTG蛋白活性及其绞联产物的水平均明显增高。因此,tTG可能成为防治DCM新的理想治疗靶。近年来,随着中医药在糖尿病慢性并发症防治研究中的不断深入,运用中医药防治DCM的实验及临床研究工作显示出广阔前景。葫芦巴是我国的传统中药,系豆科蝶形花亚科一年生草本植物,又名芸香草,其性温、味苦、无毒,具有祛寒湿,补肾阳,止痛之功效。葫芦巴总皂苷(TFGs)为葫芦巴种子的提取物,国内外学者近年来对其进行广泛研究表明,葫芦巴总皂苷的药理作用十分广泛,具有降血糖、降血脂,预防动脉粥样硬化和冠心病等功效。已有实践证实,去脂葫芦巴饮食对改善高胆固醇血症和糖尿病有益。于是我们检索了近十年的国内外相关文献,发现有关TFGs对糖尿病大鼠心肌病防治作用的研究目前尚未见报道。本课题通过观察糖尿病大鼠心肌组织中tTG的表达及其与心肌ECM积聚之间的关系,探讨其在糖尿病性心肌病发生发展中的作用,并初步探讨中药TFGs对糖尿病心肌的保护作用及相关分子机制。研究目的探讨tTG在糖尿病性心肌病发生发展中的作用,并初步探讨中药葫芦巴总皂苷对糖尿病心肌的保护作用及其作用机制。研究方法本研究采用光、电镜、胶原特染、免疫组化及逆转录PCR等技术,对STZ诱导的DM大鼠心肌组织进行观察检测,主要研究以下问题：(1)DM大鼠心肌组织tTG表达及其与细胞外基质的关系；(2)葫芦巴总皂苷对DM大鼠心肌的保护作用及相关机制。研究结果1.STZ诱发的DM大鼠12周末心肌间质细胞增生,PAS阳性物质沉着明显增多,Ⅰ型胶原、FN含量均明显增高(P<0.01、P<0.05)。经葫芦巴总皂苷(TFGs)治疗之后,上述心肌组织病变明显改善(P<0.01和P<0.05)。此外,TFGs还可明显降低血糖及血脂水平。2.STZ诱发的DM大鼠12周末心肌组织tTG蛋白和mRNA表达均明显增加(P<0.01),且其蛋白表达与细胞外基质ColⅠ和FN蛋白表达均呈显著正相关(r=0.698,P<0.05；r=0.743,P<0.05)。灌服葫芦巴总皂苷12周后,与DM模型组比较,实验组tTG蛋白和mRNA表达分别下降了44.0%和41.2%(P<0.01)。研究结论12周末DM大鼠心肌间质重构,tTG是DCM发病过程中重要的致纤维化因子,葫芦巴总皂苷对DM大鼠心肌具有保护作用,其机制可能部分是通过下调tTG而实现的。