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【背景】肿瘤生长是血管依赖性的,肿瘤通过分泌某种因子促进了内皮细胞的增殖和毛细血管的形成,而新生血管通过营养控制影响着肿瘤的生长。不仅如此,肿瘤血管生成在肿瘤从良性向恶性的转变、癌细胞进入血液循环、转移灶的发展和破裂中都起着重要作用,涉及肿瘤从形成到转移的全过程。因此,抗血管生成已成为抗肿瘤治疗新的研究热点。 近年来研究发现,某些化疗药物在小剂量、高频率的给药方式下具有抗肿瘤血管生成的作用,称为小剂量化疗或抗血管生成化疗。热疗是通过加热使肿瘤组织的温度达到40~44℃,能促进药物进入细胞,促进药物诱发的细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成。化疗联合热疗应用是一种合理的综合治疗方案。 【目的】本实验旨在国内外现有的研究基础上探讨①紫杉醇、三氧化二砷及联合应用热疗的体外抗血管生成作用;②用人结肠癌细胞作为对照,摸索紫杉醇和三氧化二砷的抗血管生成作用浓度;③紫杉醇与三氧化二砷及联合热疗的抗血管生成协同作用;④紫杉醇和三氧化二砷对鸡胚尿囊膜血管网生长的影响;⑤紫杉醇和三氧化二砷对裸鼠皮下移植瘤新生血管的影响。 【方法】采用体外人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移模型、鸡胚尿囊膜血管模型(CAM)和肿瘤移植模型,用MTT、记数法和免疫组化法观察不同浓度的紫杉醇和三氧化二砷对HUVEC的增殖、迁移抑制活性以及对CAM血管网形成、裸鼠皮下移植瘤新生血管的影响。热疗方法采用电热恒温水浴法加热至43℃,持续30min。 【结果】 1.紫杉醇在<20ng/ml浓度时对内皮细胞存活率无明显影响,在40-160ng/ml浓度范围内,内皮细胞存活率明显下降并呈剂量依赖性,相关系数为-0.975,P值为0.005;三氧化二砷在<0.2μg/ml浓度时对内皮细胞存活率无明显影响,在0.4-1.6μg/ml浓度范围内,内皮细胞存活率明显下降并呈剂量依赖性,相关系数为-0.920,P值为0.027;20-160ng/ml的紫杉醇和0.4-1.6μg/ml的三氧化二砷与热疗联合应用可增加内皮细胞的增殖,在体外均具有抗血管生成的次加作用;0.2μg/ml的三氧化二砷与热疗联合应用在体外具有抗血管生成的协同作用;40ng/ml的紫杉醇联合0.4μg/ml的三氧化二砷以及联合热疗应用,与单