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一、目的和意义随着现代社会发展需求,海洋事业活动日益频繁,海上作业或作战人员在受到各种外伤或战伤后伤口常常受到海水污染,甚至直接浸泡于海水之中,不仅对全身造成影响,还有可能影响伤口的修复。由于受受伤环境限制,患者很难得到较为及时、正确的救治。烧伤合并海水浸泡对伤情的影响也越来越受国内外学者关注,但迄今为止有关海水浸泡对烧伤创面微循环影响极其处理措施的研究鲜有报道,相关临床治疗方案更是匮乏。本研究以10%TBSA深Ⅱ度烫伤大鼠作为模型,分别从创面组织病理损害特点、创面皮下毛细血管网及其内皮细胞超微结构改变、创面水肿程度、血清血栓素B(TXB2)以及创面氧自由基(OFR)含量变化等几方面探讨大鼠烫伤后海水浸泡对其创面微循环的影响及可能的作用机制,并探讨局部治疗的可行性和有效性,为平战时海上烧、创伤救治提供理论参考依据。二、材料和方法1、实验动物和分组:SPF级Wistar大鼠168只,体重为180~220g,雌雄不限,按体重配伍随机分为正常对照组(A组)、单纯烫伤组(B组),每组21只;实验组分成烫伤后合并人工海水浸泡1h、3h组两大组,每大组63只,每大组相应再分成烫伤后单纯海水浸泡组(C1、D1组)、海水浸泡后淡水冲洗20min组(C2、D2组)以及海水浸泡后淡水湿敷1h组(C3、D3组)等伤后处理组,每组21只。2、致伤方法:试验时用25g/L戊巴比妥钠(35mg/kg)腹腔注射将大鼠麻醉后以80g/L硫化钠背部脱毛,清水将已脱毛区域洗净后自然晾干;除A组外,将其余各组动物四肢固定,将已脱毛区域置于95℃恒温水浴中12s,造成实验动物10%TBSA深Ⅱ度烫伤(已经病理证实),致伤后再将海水浸泡组动物双前肢一下皮肤浸泡于海水中,浸泡时间分别为1h和3h。海水浸泡后每大组即分别随机抽取21只动物进行单纯观察、淡水冲洗20分钟、淡水湿敷1小时等处理。动物创面均用无菌医用贴膜保护。3、检测指标及方法:分别于伤后1、3、5d肉眼观察创面肿胀程度和分泌物等大体情况;于伤后1、3、5d切取创面组织做光镜病理学观察、电子显微镜观察;取材的同时抽取动物动脉血,用ELISA法检测血清中TXB2以及组织匀浆上清液OFR的含量;利用干湿重法计算创面组织含水量。4、数据处理:所有数据以(?)±S表示,采用SPSS13.0社会科学统计软件包进行统计学处理,对血清中TXB2、组织匀浆上清液OFR以及创面组织含水量进行析因方差分析、单因素方差分析,组内多重比较采用SNK方法,P<0.05为显著性差异。三、结果1、创面大体观察:伤后1d,除A组外其余各组动物创面肿胀,其中B组可见一定程度渗出,其余各组动物创面干燥,以D1组最为明显。伤后2~3d,B组动物创面肿胀稍有消退,创面未完全干燥,呈灰黄色小范围坏死。C2、C3、D2、D3组创面干燥,创面坏死范围较B组稍大,并形成干痂。C1、D1组创面坏死较为明显,大部分C1组动物多为小范围坏死缺损,而D1组动物已坏死创面融合成片。伤后4~5d,C1组和D1组动物已坏死创面变成黄褐色,部分动物坏死创面周围有少量脓性分泌物,B组和大部分C2、C3、D2、D3组动物创面成痂。2、创面组织病理形态学观察:伤后1d,除A组外其余各组动物创面表皮脱落坏死,部分真皮附件发生水肿坏死,微血管扩张充血,少量炎性细胞浸润,以C1、D1组明显。伤后3d,B、C、D组动物组织水肿程度、微血管扩张充血仍旧明显,真皮附件坏死增多,有不同程度的炎性细胞浸润,其中以C1、D1组明显,C2、C3、D2、D3组血管扩张充血、炎性细胞浸润程度稍轻,真皮附件坏死、胶原水肿均较C1、D1组轻。伤后5d,B组动物组织水肿程度、微血管扩张充血、真皮附件坏死较前已明显减轻,C1组和D1微血管仍旧明显扩张充血,部分真皮坏死脱落,部分真皮全层残留部分结构,可见大量的炎性细胞浸润和红细胞渗出,胶原显著水肿伴大片坏死,以D1组最为严重。3、电子显微镜下创面皮下毛细血管网及内皮细胞(下简称细胞)形态学改变:正常的毛细血管,基膜完整,腔内绒毛、内皮细胞边缘清晰,形态饱满,内皮细胞间的连接以及细胞内的吞饮泡清晰可见;B组毛细血管基膜完整,腔内有血栓,内皮细胞肿胀,间隙增大,胞质松散;C1组毛细血管基膜可见,血管腔中可见红细胞堆积,内皮细胞肿胀明显,间隙明显增大,胞质松散,胞浆内出现空泡样物,内皮细胞腔面胞膜失去,部分细胞失去完整结构;D1组毛细血管基膜消失,部分内皮细胞肿胀、胞质松散,失去完整细胞结构,部分细胞皱缩,部分细胞已有脱落,形成空洞;治疗组毛细血管基膜可见,内皮细胞肿胀,线粒体及高尔基体无明显异常,胞质中偶可见液滴。4、血清中血栓素TXB2和创面组织匀浆上清液OFR的含量变化:除A组外各组动物血清TXB2和创面组织匀浆上清液OFR的含量均随海水浸泡时间延长而大幅度升高,并在伤后的1~5d中呈进行性升高趋势;伤后立即使用淡水对海水浸泡过的创面进行冲洗或湿敷可不同程度的降低动物血清血栓素和创面组织OFR的含量。各组间以及时相点间含量变化差异显著(P<0.01)。5、创面含水量:较A组动物,其余各组动物创面组织含水量均有不同程度升高,其中烫伤后海水浸泡组升高较为明显,浸泡时间越长升高幅度越大;除A组动物外,各组创面组织含水量在伤后1d开始升高,于伤后3d达到峰值,海水浸泡组伤后5d小幅度下降但仍明显高于伤前值。海水浸泡1h后使用淡水对海水浸泡过的创面进行冲洗或湿敷可降低创面组织含水量,以上各组间以及时相点间创面组织含水量变化差异显著(P值<0.05),而海水浸泡3h后对创面进行冲洗或湿敷均未明显降低创面组织含水量,组间无显著差异(P值=0.074)。四、结论1、大鼠烫伤后合并海水浸泡可使创面微循环发生进行性障碍,从而加深创面损伤程度。其机制可能为海水高渗、碱性状态致使组织细胞脱水、变性坏死,尤其是加重了皮下毛细血管网内皮细胞损伤、使局部OFR和血清TXB2增多而进一步加剧创面微循环障碍和创面组织损伤。2、大鼠烫伤后合并海水浸泡其创面加深程度与海水浸泡时间明显相关,随浸泡时间延长损伤程度越大,表明海水浸泡对开放性创面转归有负面影响。3、大鼠烫伤合并海水浸泡后早期即用淡水冲洗或湿敷均可不同程度的减轻海水高渗、碱性状态对创面微循环的损伤,表明及时有效使创面脱离海水浸泡的特殊环境是缓解伤情的重要措施。