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目的 视网膜是一片能感光的脑组织,而视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)是其终端输出神经元,在视网膜信息整合和传导过程中扮演着极为重要的角色。视网膜不同纬度光感受器细胞(视锥细胞和视杆细胞)、双极细胞、RGC密度上的差异对视网膜的中枢联系具有重大意义,尤其是RGC在视网膜各处的密度决定其投射到脑的信息量。关于RGC的研究,国内外都有过报道,但存在众多分歧。而且,直至目前,仍未见有关于大鼠RGC分布的系统研究报道。本实验运用荧光金(Fluoro-Gold,FG)经S-D大鼠双侧上丘(superior colliculus,CS)和背外侧膝状体核(dorsal lateral geniculate body nucleus,dLGN)进行四点逆行标记,目的是根据实验结果绘制出RGC分布密度图,从而为在脑上标出视网膜投射局部位点,并进一步研究其传递光学信息的不同生理功能奠定坚实基础,为人类视觉科学研究提供参考。 材料与方法 配制溶于0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS,pH7.4)的10g/L FG,含10g/L二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)。开颅后双侧CS和dLGN四点注射以逆行标记RGC,4周后0.1mol/L PBS和4%多聚甲醛(溶于0.1mol/L PBS,pH7.4)心脏灌注,用缝线和碳素标记方位后摘取双侧眼球,改良的AGFD眼球固定液固定5h。眼球固定过程中,取双侧CS和dLGN组织作冰冻切片,在荧光显微镜下通过UV激发光系统观察,均有荧光发射视为注射成功。注射成功者,制备全视网膜定向铺片标本,在荧光显微镜下观察照相,分别计数每张视网膜嘴侧(rostral,R)、腹侧(ventral,V)、尾侧(caudal,C)、背侧(dorsal,D)、腹嘴侧(rostral-ventral,VR)、腹尾侧(caudal-ventral,VC)、背嘴侧(rostral-dorsal,DR)和背尾侧(caudal-dorsal,DC)共8条半子午线方向上距视盘边缘0.1mm、0.3mm、0.6mm、1.0mm、1.5mm、2.2mm、3.2mm、