IFN-γ联用MMC对胃癌MGC-803细胞的增殖、凋亡的影响

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肿瘤的本质是增殖与凋亡的失衡,诱导细胞凋亡(Apoptosis,APO)已成为肿瘤治疗的新模式。目前很多学者尝试联合使用化疗药物与细胞因子以提高肿瘤的治疗效果和减少药物副作用。探讨化疗药物与细胞因子的最佳联合方案及化疗药物对肿瘤细胞的抗增殖、诱导凋亡作用及相关凋亡基因蛋白表达的影响,有助于给临床提供实验依据,有助于揭示化疗药物的作用机制。本实验通过MTT法、TUNEL法、免疫细胞化学法(PCNA),研究了干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)联用MMC对胃癌MGC-803细胞的抗增殖、诱导凋亡作用。实验结果如下:(1)MTT法结果:MMC在0.1~0.5μg/ml范围内,IFN-γ在50~10000U/ml范围内,对MGC-803细胞均有抑制作用, 表现出浓度依赖性关系,除个别浓度间无显著性差异(P>0.05)外,不同浓度间均有显著性差异(P<0.05或P<0.01或P<0.001),MMC的ID50浓度为0.3μg/ml,MMC ID50浓度与不同浓度的IFN-γ联合用药时,IFN-<WP=4>γ显著提高了MGC-803细胞的抑制率(P<0.05或P<0.01或P<0.001);(2)TUNEL法与PCNA的免疫细胞化学法的结果:0.2、0.3、0.4μg/ml 与250、1000、3000、10000 U/ml IFN-γ分别诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖,表现出浓度时间依赖性关系,除个别浓度与个别时间之间无显著性差异(P>0.05)外,不同浓度与不同作用时间之间均有显著性差异(P<0.05或P<0.01或P<0.001),0.3μg/ml MMC与不同浓度的IFN-γ联合用药时,IFN-γ显著提高MGC-803细胞的APO%与降低PCNA阳性表达率(P<0.05或P<0.01或P<0.001);(3) MTT法、TUNEL法与PCNA的免疫细胞化学法比较结果: MTT法检测的抑制率与TUNEL法检测的APO%呈正相关,r=0.968(P <0.01),MTT法检测的抑制率与免疫细胞化学方法检测的PCNA阳性表达率呈负相关,r =- 0.819 (P<0.01),TUNEL法检测的APO%与免疫细胞化学方法检测的PCNA阳性表达率也呈负相关,r = - 0.828(P <0.01)。实验结果表明:(1)MMC和IFN-γ分别对MGC-803胃癌细胞抗增殖,诱导细胞凋亡,且这两药物联合用药时,IFN-γ明显增强MMC的抗增殖作用与诱导凋亡作用;(2) TUNEL法、PCNA的免疫细胞化学方法可用于肿瘤药物敏感性检测;
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