随着纳米科技的兴起,纳米金粒子以其独特的光学、电学性质在许多领域表现出潜在的应用价值,引起了人们浓厚的研究兴趣。由于不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题，纳米金粒子作为标记物或显色剂应用于免疫诊断和免疫分析中，逐渐取代传统的三大标记技术，也逐渐有取代酶联免疫分析等检测方法的趋势。因此探索用纳米金粒子标记建立快速简便的免疫学定量检测方法，有重要的研究意义。本文主要是建立新颖的纳米金粒子标记的免疫分析方法。 为了制备尺寸均一、单分散的纳米金粒子，本文采用两种水相合成纳米金粒子的方法，选择不同的配方及条件，制备粒径不同的金颗粒。然后进行纳米金粒子对蛋白质的标记，主要采用两种方法，其一是抗体蛋白在一定pH条件下通过静电和配位作用与纳米金粒子相互连接，利用纳米金粒子的荧光淬灭性质，以及粒子表面的Zeta电位探索纳米金粒子与蛋白质的连接机理，寻找最佳的连接条件。其二是将抗体蛋白进行水解还原后产生Fab’片段，裸露出巯基，与纳米金粒子形成稳定的Au－S共价键，从而进行标记。比较两种标记方法，选择较好的方法应用于免疫学检测。 利用纳米金粒子的光学性能和荧光淬灭性能，建立两种新颖的免疫分析方法，即免疫纳米金凝集分光光度法和荧光淬灭分析法，检测两种常用的肿瘤标志物即癌胚抗原和甲胎蛋白，应用于疾病的诊断。 免疫纳米金凝集分光光度法是采用纳米金颗粒分别标记癌胚抗原相匹配的两种抗体，通过免疫反应形成金标记抗体1－抗原－金标记抗体2复合物，研究反应溶液中复合物光学性质的变化，寻找定量免疫分析的方法，建立纳米金标记免疫凝集光度法，定量检测癌胚抗原，最低检测极限为15ng/mL。该方法只需检测纳米金粒子的光吸收变化就可检测癌胚抗原的浓度，不需要分离抗原抗体的复合物，可直接检测，简单方便。 免疫纳米金荧光淬灭分析法是采用纳米磁粒子和纳米金粒子分别标记甲胎蛋白相匹配的两种抗体，通过免疫反应在磁颗粒表面形成抗原抗体复合物。在磁场的作用下，分离复合物与游离的纳米金标记物，在游离物中加入荧光物质——异硫氰酸荧光素，荧光信号淬灭，研究在516nm处信号淬灭的程度与体系中被测物量的相关性，从而建立纳米金标记免疫荧光淬灭定量检测甲胎蛋白的分析方法，检测极限达12ng/mL。该方法可以检测相匹配的目标分子，灵敏度高，在免疫分析和疾病诊断中有着广阔的应用前景。