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活血丹Glechoma longituba(Nakai)Kupr.为唇形科多年生草本植物,干燥地上部分入药,是2015年版《中国药典》收录中药材连钱草的基原植物,主产于江苏、浙江一带,有清热解毒、利尿通淋、散淤消肿的功效,在临床上广泛应用于胆囊炎、胆结石、肾结石等症的治疗。本文在对中国不同产地野生活血丹药材品质及其根际土壤基本特性相关性分析和灰色关联度分析的基础上,筛选出影响活血丹药材品质的主要土壤特性:土壤容重、土壤酸碱度和土壤有机质,分别采用单因素试验研究上述土壤因子对活血丹生长、生理及其主要活性成分含量变化的影响;并利用正交试验(三因素三水平)进一步优化最利于活血丹植株生长及其药材品质形成的处理方式,主要结果如下:
1、活血丹在中国分布广泛,根据不同产地野生活血丹药材活性成分含量与其根际土壤理化性质的灰色关联度分析可知,土壤容重、土壤酸碱度和土壤有机质与活血丹药材活性成分关联度较高。
2、活血丹各生长指标和生物量均随着土壤容重的增加先升后降。在土壤容重1.0g·cm-3处理达到最大值。适宜的土壤容重(1.0g·cm-3)有利于光合色素的积累、可溶性蛋白和游离氨基酸的合成;活血丹药材醇溶性浸出物均达到药典规定不低于25%的标准,在1.0g·cm-3处理达到最大值40.66%,总黄酮含量随着土壤容重的增加逐渐增加,三萜酸和酚酸类物质随着土壤容重的增加逐渐减少。1.0g·cm-3容重处理有利于活血丹生长发育及其药材品质形成。
3、活血丹对土壤酸碱度适应范围较宽,活血丹植株在土壤pH4.5~8.5范围均能生长,在土壤pH9.5时不能存活:在pH4.5到pH8.5范围内,活血丹生长指标及生物量呈先升后降的趋势,在pH6.5达到峰值;活血丹叶片保护酶活性及叶绿素含量先升后降,可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸、丙二醛含量先降后升;活血丹药材醇溶性浸出物含量均大于25%,总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量先升后降,在pH6.5时出现峰值,而绿原酸和咖啡酸含量在pH6.5~8.5之间无显著差异、整体较高。土壤pH对活血丹生长、生理特性及其药材品质影响显著,中性至微酸性土壤环境有利于活血丹生长及其药材品质形成。
4、添加有机基质处理活血丹生长指标和生物量均比对照高,且随着土壤有机基质含量的增加先增加后减少,在有机基质含量为10%时达到最大值。保护酶活性随着土壤有机质含量增加逐渐降低,游离氨基酸和可溶性蛋白含量随着土壤有机质含量的增加先升后降,光合色素含量随着土壤有机质含量的增加先升后降,在有机基质含量为10%时达到峰值;醇溶性浸出物含量均达到药典规定标准,总黄酮和齐墩果酸含量随着土壤有机质含量的增加逐渐升高,绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸含量随着土壤有机质的增加先升后降,熊果酸含量峰值在有机基质含量15%时出现,为3.63mg·g-1,而绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸含量峰值在有机基质含量10%时出现,且均显著高于对照。土壤有机质含量对活血丹生长及其药材品质形成有显著的影响,有机基质含量在10%至15%范围有利于活血丹生长及其药材品质形成。
5、设计三因素三水平正交试验,处理5(土壤容重1.0g·cm-3、pH6.5、15%有机基质)活血丹生长状态最好,可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸含量高,丙二醛含量低,醇溶性浸出物、三萜酸和酚酸含量高,表明5处理有利于活血丹生长及其药材品质形成。多重比较可知,对活血丹生长影响顺序为:土壤容重>有机质>土壤pH;对活血丹生理及其药材品质影响顺序为:土壤容重>土壤pH>土壤有机质。由方差分析可知,土壤容重单因子、土壤酸碱度与土壤有机质交互作用是活血丹产量与品质形成的主效因子。土壤容重、酸碱度和有机质含量对活血丹生长、生理及其药材品质有显著的影响,最适合活血丹生长及其药材品质形成的处理为土壤容重1.0g·cm-3、pH6.5、15%有机基质。
1、活血丹在中国分布广泛,根据不同产地野生活血丹药材活性成分含量与其根际土壤理化性质的灰色关联度分析可知,土壤容重、土壤酸碱度和土壤有机质与活血丹药材活性成分关联度较高。
2、活血丹各生长指标和生物量均随着土壤容重的增加先升后降。在土壤容重1.0g·cm-3处理达到最大值。适宜的土壤容重(1.0g·cm-3)有利于光合色素的积累、可溶性蛋白和游离氨基酸的合成;活血丹药材醇溶性浸出物均达到药典规定不低于25%的标准,在1.0g·cm-3处理达到最大值40.66%,总黄酮含量随着土壤容重的增加逐渐增加,三萜酸和酚酸类物质随着土壤容重的增加逐渐减少。1.0g·cm-3容重处理有利于活血丹生长发育及其药材品质形成。
3、活血丹对土壤酸碱度适应范围较宽,活血丹植株在土壤pH4.5~8.5范围均能生长,在土壤pH9.5时不能存活:在pH4.5到pH8.5范围内,活血丹生长指标及生物量呈先升后降的趋势,在pH6.5达到峰值;活血丹叶片保护酶活性及叶绿素含量先升后降,可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸、丙二醛含量先降后升;活血丹药材醇溶性浸出物含量均大于25%,总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量先升后降,在pH6.5时出现峰值,而绿原酸和咖啡酸含量在pH6.5~8.5之间无显著差异、整体较高。土壤pH对活血丹生长、生理特性及其药材品质影响显著,中性至微酸性土壤环境有利于活血丹生长及其药材品质形成。
4、添加有机基质处理活血丹生长指标和生物量均比对照高,且随着土壤有机基质含量的增加先增加后减少,在有机基质含量为10%时达到最大值。保护酶活性随着土壤有机质含量增加逐渐降低,游离氨基酸和可溶性蛋白含量随着土壤有机质含量的增加先升后降,光合色素含量随着土壤有机质含量的增加先升后降,在有机基质含量为10%时达到峰值;醇溶性浸出物含量均达到药典规定标准,总黄酮和齐墩果酸含量随着土壤有机质含量的增加逐渐升高,绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸含量随着土壤有机质的增加先升后降,熊果酸含量峰值在有机基质含量15%时出现,为3.63mg·g-1,而绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸含量峰值在有机基质含量10%时出现,且均显著高于对照。土壤有机质含量对活血丹生长及其药材品质形成有显著的影响,有机基质含量在10%至15%范围有利于活血丹生长及其药材品质形成。
5、设计三因素三水平正交试验,处理5(土壤容重1.0g·cm-3、pH6.5、15%有机基质)活血丹生长状态最好,可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸含量高,丙二醛含量低,醇溶性浸出物、三萜酸和酚酸含量高,表明5处理有利于活血丹生长及其药材品质形成。多重比较可知,对活血丹生长影响顺序为:土壤容重>有机质>土壤pH;对活血丹生理及其药材品质影响顺序为:土壤容重>土壤pH>土壤有机质。由方差分析可知,土壤容重单因子、土壤酸碱度与土壤有机质交互作用是活血丹产量与品质形成的主效因子。土壤容重、酸碱度和有机质含量对活血丹生长、生理及其药材品质有显著的影响,最适合活血丹生长及其药材品质形成的处理为土壤容重1.0g·cm-3、pH6.5、15%有机基质。