疏肝消脂Ⅲ方胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏CYP2E1基因表达的影响

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目的:通过建立非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型,探讨疏肝消脂Ⅲ方胶囊(SXRⅢC)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的治疗作用及对肝组织细胞色素CYP2E1m RNA表达的影响,进一步探析本方对NAFLD的作用机制,并为临床试验及安全用药提供科学的实验依据。方法:将46只SPF级健康雄性(Sprague-Dawlay,SD)大鼠随机分成正常组10只,模型组12只,水飞蓟宾胶囊组12只及疏肝消脂Ⅲ方胶囊组12只。正常组大鼠予普通饲料喂养及等量生理盐水灌胃;模型组及两药物组按1m L/100g体重灌服高脂乳剂,6周末检测大鼠甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平,并分别抽取模型组、水飞蓟宾胶囊组及疏肝消脂Ⅲ方胶囊组各2只大鼠做肝脏病理切片,提示造模成功。在实验进行到第7周时对药物组大鼠灌胃给药。正常对照组和NAFLD模型组每日予生理盐水灌胃(1ml/100g);药物组每日分别予水飞蓟宾胶囊(44.1mg/kg)及疏肝消脂Ⅲ方胶囊溶液(315mg/kg)灌胃。药物治疗4周后(即实验第10周末),观察大鼠精神状态、皮毛光泽度、活动情况,测体长及体重,然后采取颈椎脱臼法处死大鼠,采血制备血清,摘取肝脏后称取全肝湿重并记算肝指数,按常规制备肝匀浆、肝组织石蜡切片标本。检测并比较各组间血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)的含量,可见光法测定肝匀浆CAT活力,荧光定量(QPCR)法检测肝组织CYP2E1 m RNA水平,HE染色法观察各组肝组织病理改变。结果:1.与正常对照组比较:模型组大鼠肝指数、血清生化水平(ALT、AST、TC、TG、HDL-C、LDL-C)、肝匀浆CYP2E1m RNA均升高(P<0.01),大鼠体重、体长增长减慢(P<0.01);肝匀浆CAT活力下降(P<0.01);肝组织病理学表现呈中重度脂肪变性。2.与模型组比较:疏肝消脂Ⅲ方胶囊组大鼠肝指数、血清生化指标水平(ALT、AST、TC、TG、LDL-C)、肝匀浆CYP2E1m RNA均有不同程度下降(P<0.01),但大鼠体重、体长升高(P<0.05);肝匀浆CAT活力升高(P<0.01);肝组织脂肪变性程度及炎症反应相对减轻。3.与水飞蓟宾胶囊组比较:疏肝消脂Ⅲ方胶囊组大鼠肝指数、血清生化指标水平(ALT、AST、TC、TG、HDL-C、LDL-C)、肝匀浆CYP2E1m RNA均有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05),大鼠体重、体长稍增加,但无统计学意义(P>0.05);肝匀浆CAT活力升高无统计学意义(P>0.05);肝组织病理表现无明显差别。结论:疏肝消脂Ⅲ方胶囊能改善NAFLD大鼠血脂代谢紊乱、肝功能及减轻肝脏脂肪变性、肝细胞炎症,对NAFLD具有治疗作用。高脂饮食能导致实验性NAFLD大鼠抗氧化物CAT活力下降、肝内CYP2Elm RNA表达量显著升高,疏肝消脂Ⅲ方胶囊能明显升高CAT活力,且抑制肝细胞中CYP2E1基因的表达,从而减轻氧应激和脂质过氧化反应。
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