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罗勒烯是姜花香气物质的主要成分之一,其合成释放受到多方面因素的影响,而植物激素在其中发挥着重要的作用。乙烯作为一种气体植物激素在植物的整个生命进程中参与诸多生理生化反应,并且与植物开花以及香气物质的合成释放存在着密切的联系。本论文以姜花为研究对象,通过进行外源乙烯和乙烯抑制剂1-MCP处理结合对不同发育时期的姜花花器官进行GC-MS测气分析,再进行荧光定量分析相关基因的表达量,探索了乙烯与姜花主要香气成分罗勒烯合成释放的关系;采用RT-PCR技术,从姜花花朵中克隆了两个EIN3/EIL1家族成员基因,分别命名为HcEIL1-1和HcEIL1-2;通过采用病毒沉默、实时荧光定量PCR、酵母双杂交、双分子荧光互补以及亚细胞定位等技术,探究了HcEIL1-1和HcEIL1-2对香气释放和相关萜类合成酶基因及转录因子HcMYC2-1的调控作用;通过酵母单杂交和双荧光素酶等技术,探索了HcEIL1-1和HcEIL1-2与罗勒烯的关键合成酶基因HcTPS3启动子的调控关系。为研究姜花萜类香气物质形成的分子机制和乙烯信号途径调控花香物质的合成释放奠定了理论基础。本文取得的主要结果如下:1、采用RT-PCR技术,以姜花花朵cDNA为模板克隆了两个EIN3/EIL1家族成员基因,分别命名为HcEIL1-1和HcEIL1-2。序列分析发现,HcEIL1-1的最大阅读长度为1863 bp,编码620个氨基酸,HcEIL1-2的最大阅读长度为1848 bp,编码615个氨基酸。系统进化树分析表明,HcEIL1-1和HcEIL1-2分别与野生香蕉的两个EIL1聚为一类,但彼此之间相距较远,预示着它们之间存在功能差异性。氨基酸序列分析发现,HcEIL1-1和HcEIL1-2都有EIN3/EIL1的保守序列及特征区域,一个酸性氨基酸聚集区(AD),一个脯氨酸富集区(PR),以及五个碱性氨基酸聚集区(BDⅠ-Ⅴ)。2、通过利用外源乙烯和1-MCP对姜花处理,测定花发育不同时期罗勒烯释放的动态变化,结果表明,乙烯处理后各个时期罗勒烯的释放量都高于对照组,而1-MCP处理后各个时期罗勒烯的释放量都低于对照组;结合荧光定量分析发现,与对照组相比,乙烯能够提高不同时期HcEIL1-1、HcEIL1-2和罗勒烯合成酶基因HcTPS3的表达量,而1-MCP会抑制这些基因的表达,并且HcTPS3的表达规律与HcEIL1-1和HcEIL1-2的表达规律趋于一致。3、对姜花花瓣进行瞬时病毒沉默后,进行GC-MS测气分析,结果表明:沉默HcEIL1-1后,罗勒烯、沉香醇和别罗勒烯分别下降了33%、37%和47%,且都达到极显著差异;沉默HcEIL1-2后,罗勒烯、沉香醇和别罗勒烯分别下降了33%、42%和49%,且都达到极显著差异。结合荧光定量分析发现:沉默HcEIL1-1后,HcEIL1-1的表达量下降了46%,HcMYC2-1、HcTPS1、HcTPS3和HcTPS10的表达量分别下降了53%、53%、40%和50%;而沉默HcEIL1-2后,HcEIL1-2的表达量下降了70%,HcMYC2-1、HcTPS1、HcTPS3和HcTPS10的表达量分别下降了15%、13%、42%和13%。4、分别将HcEIL1-1和HcEIL1-2的全长基因片段构建到p35S-GFP载体上,通过PEG介导拟南芥原生质体,结果表明,HcEIL1-1和HcEIL1-2都定位在细胞核内。5、分别构建HcEIL1-1和HcEIL1-2全长酵母双杂捕获载体与HcMYC2-1诱饵载体进行酵母双杂交,结果表明HcEIL1-1和HcEIL1-2均可与HcMYC2-1互作。为了排除酵母双杂的假阳性组合,分别将HcEIL1-1和HcEIL1-2构建在pUC-SPYCE载体上与pUC-SPYCE-HcMYC2-1进行双分子荧光互补,结果表明只有HcEIL1-1能与HcMYC2-1互作。6、分别构建HcEIL1-1和HcEIL1-2的酵母单杂表达载体与HcTPS3启动子的诱饵载体共转酵母菌进行酵母单杂交,结果表明,HcEIL1-1能与HcTPS3启动子结合。进一步进行双荧光素酶试验发现,HcEIL1-1和HcEIL1-2都可以与HcTPS3启动子结合,且与对照相比,pGreen-Ⅱ-62-SK-HcEIL1-1+HcTPS3-LUC的LUC/REN荧光比值提高了4.75倍;pGreen-Ⅱ-62-SK-HcEIL1-2+HcTPS3-LUC的LUC/REN荧光比值3.63倍。