阿纳其根化学成分及其酪氨酸酶活性筛选研究

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目的:1、对阿纳其根化学成分进行系统预试,为阿纳其根化学成分研究提供理论依据。2、对阿纳其根脂肪酸组成进行分析和鉴定,并对其脂肪酸进行PTP1B的抑制作用研究。3、对阿纳其根乙酸乙酯萃取部位中的化学成分进行分离鉴定并进行酪氨酸酶活性筛选研究。方法:1、采用试管及滤纸预试法对阿纳其根化学成分进行了预试。2、利用三种不同溶剂(正己烷、乙醚、氯仿)经索氏提取法提取阿纳其根中的油脂成分,经甲酯化后,用气相色谱-质谱法(GC/MS)对脂肪酸组成进行了分析和鉴定并用微量法测定PTP1B活性抑制作用。3、以活性跟踪为主,对阿纳其根乙酸乙酯萃取部分用薄层层析、柱层析及重结晶等分离纯化技术分离纯化以及采用酪氨酸酶多巴速率氧化法测定阿纳其根不同部位对酪氨酸酶活性。结果:1、通过系统预试可知,其化学成分主要是挥发油、有机酸、鞣质、生物碱、醌类、黄酮类、强心苷类、氨基酸、糖类等成分,但未检测出香豆素、酚类、肽和蛋白质类、皂苷类等化合物;预试结果与《维吾尔药志》中记载的阿纳其根化学成分基本一致。2、用正己烷提取的阿纳其根油脂中共鉴定出了8种脂肪酸:其中亚油酸为36.341%、棕榈酸为34.268%、油酸为19.656%;乙醚提取的油脂中共鉴定出了10种脂肪酸:其中亚油酸为34.102%、棕榈酸为32.916%、油酸为20.000%、亚麻酸为5.329%;氯仿提取油脂中共鉴定出了5种脂肪酸:其中亚油酸为42.427%、棕榈酸为40.952%、油酸为11.250%;阿纳其根脂肪酸对PTP1B有较强的抑制作用,其IC50分别为5.27±0.40μg/mL、4.71±0.08μg/mL、7.01±1.98μg/mL。3、从阿纳其根乙酸乙酯萃取部位分离得到5个化合物,经1H-NMR、13C-NMR、DEPT、HMBC分析确定为:Ⅰ为十四-2E,4E-二烯-8,10-二烯酸酪胺(5.9mg),Ⅱ为十二-2E,4E-二烯酸-4-羟基苯乙胺(8.6mg),Ⅲ为6-甲氧基-7-羟基-2-氧代喹啉(4.4mg),Ⅳ为十-2E,4E-二烯酸-4-羟基苯乙胺;(7.5mg),V为6,8-二甲氧基-7-羟基-2-氧代喹啉(3.9mg);其中化合Ⅲ和V为新化合物。阿纳其根不同部位对酪氨酸酶活性测定实验中乙酸乙酯部位对酪氨酸酶激活作用最强,p﹤0.05;乙酸乙酯部位分离的22个馏分对酪氨酸酶也有不同程度的激活率;分离得到的5个单体化合物对酪氨酸酶有一定程度激活作用。结论:本试验中所用的提取方法简单,以植物化学理论和现代化学分离分析技术为基础,对阿纳其根的化学成分进行了系统预试,在此基础上对阿纳其根三种溶剂提取的脂肪酸组成进行分析和鉴定,并测定其对PTP1B抑制作用;阿纳其根乙酸乙酯萃取部位化学成分进行分离、结构鉴定并进行酪氨酸酶活性筛选。该研究结果表明,阿纳其根对酪氨酸活性激活作用,此研究结果为进一步认识和合理开发利用该植物资源提供了一定的参考利用价值及实验基础。
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