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牛初乳是指奶牛产犊后7天内所分泌的乳,牛初乳含有丰富的营养成分和多种生物活性物质。开发出合理的分离技术路线以提取高纯度高活性的天然活性蛋白质。针对牛初乳中乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)和免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)做了分离纯化的研究,主要工作包括:初乳中Lu的单一提纯;综合提取牛初乳中的Lf和IgG;应用于离子交换的模拟移动床(Simulated Moving Bed, SMB)连续离子交换设备研制与系统优化。 从牛初乳中纯化乳铁蛋白,采用脱脂牛初乳作为原料,经过添装CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换剂的离子交换柱,初乳中If吸附于交换柱,通过1.6%与5.0%NaCl盐浓度阶越洗脱,获得了96.6%的乳铁蛋白产品。 从牛初乳乳清中制备乳铁蛋白和IgG,设计了一条阴阳离子交换串联的工艺,脱脂牛初乳通过滴加6mol/L HCl调节其pH至4.0,以5000 r/min离心分离20min除去酪蛋白制得乳清,缓慢滴加1mol/L NaOH回调其pH至6.8,处理后的乳清经截留相对分子质量为50,000超滤稀释,经过阴阳离子交换串联色谱,乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)吸附于CM-Sepharose Fast Flow,免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)吸附于DEAE-Sepharose Fast Flow,阳离子交换柱用C(NaCl)=0.27mol/L、0.85mol/L水溶液阶越洗脱,得到纯度为96.6%的Lf产品,阴离子交换柱用C(NaCl)=17mmol/L、51mmol/L水溶液阶越洗脱得到纯度为95%的IgG产品。 设计了一套SMB连续例子交换设备,并在其上面实现了Lf的连续离子交换生产,效率较一般离子交换操作提高2倍。